Mycobacterium 결핵의 항균 자화율 시험에 도전하지만, 환자 치료를 위해 중요합니다. 이 microtiter 플레이트 형식 12 antimycobacterial 마약 테스트를 제공하며 적절한 치료에 도움이됩니다 최소 억제 농도 (MIC) 값을 제공합니다.
항균 저항의 급속한 탐지 방지 Mycobacterium 결핵 (MTB)의 증가를 제어하기 위해 노력 중요합니다. MTB의 항균 자화율 테스트 (대서양 표준시)는 전통적으로 비례의 한천 방법으로 또는 / BACTEC (백톤 디킨슨, 스파크, MD), VersaTREK (트렉 진단, 클리블랜드, OH) 또는 BacT와 같은 악기에 macrobroth 테스트에 의해 수행되었습니다 알림 (bioMérieux, 하젤우드, MO). 고려하면서 한천 비례 방법은, AST의 "황금"표준은 집중적인 노동하고 마약없는 한천에 비해 약물이 포함된 한천에 식민지 카운트를 수행하여 저항의 계산이 필요합니다. 약물없는 매체에 비해 약물이 포함된 매체에 ≥ 1 % 성장이있다면, 유기체는 그 약물에 강한 것으로 간주됩니다. macrobroth 방법은 계측 및 첫 번째 라인 의약품에 대한 시험 브레이크 포인트 ( "중요한") 약물 농도를 (isoniazid, ethambutol, rifampin, 그리고 pyrazinamide)가 필요합니다. 방법은 96 잘 microtiter 플레이트 형식으로 상업적으로 사용할 수 있습니다 여기에 설명된 [MYCOTB (트렉 진단)]과 amikacin (둘 다 첫 번째 (isoniazid, rifampin, ethambutol)와 두 번째 라인 의약품을 포함한 결핵의 치료에 사용되는 12 antimicrobials의 증가 농도를 포함, cycloserine, ethionamide, kanamycin, moxifloxacin, ofloxacin, 패러 aminosalicylic 산, rifabutin 및 스트렙토 마이신). Pyrazinamide, 첫 번째 라인 약물은 산성 시험 조건에 대한 필요로 인해 microtiter 접시에 포함되지 않습니다. microtiter 시스템의 장점 모두 설정의 용이성 전통 한천 비중 (21 일)와 비교하여 빠른 시간에 차례 (14 일) 등이 있습니다. 또한, 접시는 국물 또는 고체 매체 중 하나를 사용하여 준비 inoculum에서 설정할 수 있습니다. microtiter 접시 형식이 새로운과 MTB가 실험실에서 고유의 안전 문제를 제시 있기 때문에,이 프로토콜은 안전하게 설치하는 방법을 설명하기 때문에, 부화 및 microtiter 접시를 참조하십시오.
긍정적인 성장 컨트롤을 가진 대서양 표준시의 microtiter 접시의 예제는 그림 1에 나와 있으며, 각각의 약물에 대한 끝점 MIC (μg / ML)이 돌고있다. 우리 연구실에서 수행 연구는 대서양 표준시의 microtiter 플레이트 방법은 Mycobacterium의 결핵의 자화율 시험을위한 황금 표준 한천 비중 방법에 해당하는 것을 지적했다. 대서양 표준시 microtiter 플레이트와 한천 비율 방법 14에서 21 일 동안 최종 해석 전통 한천 비율 방법과 비교하여 결과의 빠른보고가 microtiter 대서양 표준시 microtiter 플레이트와 함께 얻은 것입니다, respectively.The 대서양 표준시 microtiter 플레이트 먼저 테스트의 장점을 가지고 있으며, 두번째 라인 모성 종자와 과도한 지연을 방지할 수 있습니다 동시에 마약. 대서양 표준시 microtiter 접시 또한 APM보다 설정과 읽기 훨씬 쉽게와 같은 VIZION 같이 수동으로 거울과 세미 자동화 시스템 모두는 접시를 읽는 데 사용할 수 있습니다. 결핵 약제 내성 검사에 대한 MIC 값이 있는지의 여부는 특히 "경계선"자화율있는 사람 격리를 위해, 전통적인 중요한 농도 값에 비해 의사들에게 유용한 새로운 정보를 제공할 수 있습니다.
The authors have nothing to disclose.
우리는 공부하는 동안 그들의 도움을 메이오 클리닉 Mycobacteriology 연구소의 실험실 기술자에게 감사를 표합니다.
Name of the reagent | Company | Catalogue number |
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AST microtiter plates and adhesive seal | TREK Diagnostics, Cleveland Ohio | MYCOTB |
McFarland 0.5 standard | TREK Diagnostics, Cleveland, Ohio | E1041 |
Middlebrook 7H10 plates | Fisher | |
Blood Agar Plates | Fisher | |
Sterile loops 1 μL | Fisher | |
Sterile loops 10 μL | Fisher | |
Sensititre Saline-Tween glass bead broth | TREK Diagnostics, Cleveland, Ohio | 27143 |
7H9 OADC Broth | TREK Diagnostics, Cleveland, Ohio | T3440 |
Long Pipet Tips | Fisher | |
Sterile Troughs | TREK Diagnostics, Cleveland, Ohio | |
M. tuberculosis | ATCC | 27294 |
Pipeters: 1000, 200, 20μL | Fisher | |
Tips 1000, 20, 20 μL | Fisher | |
Multichannel Pipetter | Fisher | |
Incubator 5-10% CO2 | Fisher | |
Plastic bags, small, CO2 permeable | Poly Plastic, Delano, PA | |
TB disinfectant (Such as ProSpray C-60) | Certol International, Commerce City, CO | PSC60/32 |
Mirror Box Reader | Fisher |