و<em> في المختبر</em> طريقة لتقليد<em> في الجسم الحي</emيوصف> تمايز الظهارية. العديد من الفيروسات تستهدف الخلايا الظهارية كجزء من دورة حياتها الفيروسية، وهذه الطريقة توفر وسيلة لفحص فيروس: التفاعلات المضيف أن أكثر شبها أن الذي يحدث<em> في الجسم الحي</em>. ويمكن استخدام هذه التقنية مع الكيراتينية الأولية، وخطوط الخلايا المنشأ، فضلا عن الأنسجة المريضة طبيعي أو الخزعة.
وقد وفرت تنمية عضوي النمط الثقافات طوف الظهارية مع الباحثين فعالة في نظام المختبر أن التمايز يلخص بأمانة الظهارية. هناك العديد من الاستخدامات لهذا النظام. على سبيل المثال، كانت القدرة على النمو ثلاثي الأبعاد الثقافات طوف عضوي النمط من الخلايا الكيراتينية معلما هاما في دراسة فيروس الورم الحليمي البشري (HPV) 1. وترتبط بإحكام دورة حياة فيروس الورم الحليمي البشري إلى التفريق بين ظهارة الحرشفية 2. تظاهر عضوي النمط الثقافات طوف الظهارية كما تتكاثر هنا حياة فيروس الورم الحليمي كامل دورة، بما في ذلك إنتاج فيروس 3،4،5. وبالإضافة إلى ذلك، هذه الثقافات طوف معرض آفات خلل التنسج مماثلة لتلك التي لوحظت على العدوى في الجسم الحي مع فيروس الورم الحليمي البشري. ومن هنا يمكن أيضا أن تستخدم هذا النظام لدراسة سرطان الخلايا الظهارية، فضلا عن تأثير المخدرات على تمايز الخلايا الظهارية بشكل عام. وضعت أصلا من قبل Asselineau وPrunieras <sيصل> (6) وتعديلها من قبل Kopan وآخرون. 7، وعضوي النمط ثقافة طوف الظهارية نظام قد نضجت في عام، نموذج ثقافة سهلة نسبيا، والذي ينطوي على نمو الخلايا في الكولاجين المقابس المحافظة على واجهة الهواء السائل (الشكل 1A). على مدار 10-14 يوما، وخلايا تطبق وتفرق، وتشكيل ظهارة سمك كامل الذي ينتج التمايز محددة cytokeratins. يمكن فحص القوارب التي تحصد تشريحيا، فضلا عن مستوى التقنيات الجزيئية والكيمياء الحيوية. في هذه المقالة، ونحن تصف طريقة لتوليد الثقافات طوف من الخلايا الكيراتينية الإنسان الأساسية. ويمكن استخدام نفس الأسلوب مع إنشاء خطوط الخلايا الظهارية، ويمكن بسهولة تطويعها للاستخدام مع الأنسجة الظهارية من الخزعات طبيعي أو المريضة 8. العديد من الفيروسات الهدف إما ظهارة الغشاء المخاطي الجلدي أو كجزء من تنسخي دورة الحياة. على مدى السنوات العديدة الماضية، وجدوى استخدام عضوي النمط عبادة طوفوقد تبين أن القوام كوسيلة لدراسة التفاعلات الخلية الفيروسات المضيف لherpesviruses عدة، فضلا عن الفيروسات الغدية، parvoviruses، وpoxviruses 9. وبالتالي يمكن أن الثقافات طوف عضوي النمط يمكن تكييفها لدراسة المرضية الفيروسية، و هي الوسيلة الوحيدة لاختبار العوامل المضادة للفيروسات جديدة لتلك الفيروسات التي ليست صالحة للزراعة في خطوط الخلايا دائم.
نحن هنا وصف طريقة التي يمكن استخدامها لدراسة التمايز الظهارية بشكل عام، ولكن يمكن أيضا أن تتكيف بسهولة لدراسة المرضية الفيروسية، فضلا عن فعالية من العلاجات المحتملة. العديد من الفيروسات تستهدف الخلايا الظهارية اما الموقع الرئيسي للعدوى، كما هو الحال بالنسبة لفيرو?…
The authors have nothing to disclose.
فإن الكتاب أود أن أشكر سالي روبرتس (جامعة برمنغهام، برمنغهام المملكة المتحدة) للهدية نوع من الأجسام المضادة E1E4. وأيد هذا العمل من خلال منحة من المعهد الوطني للسرطان (4R00CA137160-03).
Name of Reagent | Company | Catalog number |
Rat Tail Collagen type 1 (4-5mg/ml) | BD Biosciences | 354236 |
DMEM without NaHC03 | Invitrogen | 12100-061 |
NaHC03 | Sigma | S5761 |
Hepes | Calbiochem | 391338 |
Stainless Steel metal grids | Williams and Mettle Co. | CR-03063-040-100-S |
E medium11 | ||
Epidermal Growth Factor | BD Biosciences | 354010 |