에있는 아이 Imaginal 디스크의 시각화에 도움을 소설 RFP 리포터 Drosophila</em

Summary

우리의 특별 표현하는 소설 빨간색 형광 단백질 (RFP) 기자를 설명<em> Drosophila</em> 눈. 우리는 세부 눈 imaginal 디스크의 해부를위한 방법론과 방법이 기자는 절개 및 개발 안구의 특정 세포 유형의 식별에 도움을 사용할 수 있습니다.

Abstract

<em> Drosophila</em> 눈으로는 neurogenesis, 신호 전달 및 neurodegeneration과 같은 분야를 공부를위한 강력한 모델 시스템입니다. 발견의 대부분은이 시스템을 사용하여 개발 눈을 imaginal 디스크의 photoreceptor 차별의 spatiotemporal 자연의 이점을 점령했다. 연구자는 식별 배우고 눈을 디스크를 해부하다하는 것은 처음 필요가이 시스템을 사용할 수 있습니다. 우리는 눈 디스크 및 개발 안구의 특정 세포 유형의 시각화의 식별에 도움을 소설 RFP 기자를 설명합니다. 우리는 세부 셋째 instar의 유충에서 눈을 imaginal 디스크의 해부를위한 방법론과 눈 – RFP 기자이 절개에 도움이 수 방법에 대해 설명합니다. 이 눈 – RFP의 기자는 눈을 표현하고 신호 증폭을위한 필요없이 살아있는 조직이나 고정 후 형광 현미경 중 하나를 사용하여 시각하실 수 있습니다. 우리는 또한이 기자는 눈을 디스크 내의 특정 세포 유형을 식별하는 데 사용될 수있는 방법을 보여줍니다. 이 프로토콜과 눈을 RFP 기자의 사용은을 사용하여 연구자를 지원합니다<em> Drosophila</em근본적으로 중요한 생물 학적 질문을 해결하기> 눈.

Protocol

<ol><li해부 현미경 Sylgard 요리에 PBS의> 처음부터 놓습니다.</li><li> 다음 주걱을 사용하여 유리병이나 용기에서 여러 방황 셋째 instar의 유충을 제거하고 PBS에서 그들을 놓으십시오.</li><li> 절개가 유충에게 후부 향해 길을 3 분의 2를 파악 후 앞쪽에 끝에있는 어두운 색깔 입 후크를 잡아 다른 쌍을 사용하는 (당신이 바로 잡 경우) 왼손의 핀셋을 사용하여 시작합니다.</li><li> 이제 부드럽게 서로 떨어?…

Discussion

Drosophila 아이 imaginal 디스크의 해부는 간단하지만, 마스터 시간이 걸릴 수 있습니다. 중요한 단계는 눈 디스크와 멀리 떨어진 애벌레 두뇌로부터 절개의 식별됩니다. 아이 디스크의 식별은 눈 – RFP 라인이 여기에 설명된 사용하고 쉽게 구성되어 있습니다. 가능한 수정 antennal 디스크 또는 peripodial 멤브레인를 제거하거나 두뇌를 입력 홍보 axons을 시각화에 연결된 광 엽을 떠날 수 있습니다. </…