のアイ成虫原基の可視化を支援するために新しいRFPレポーターショウジョウバエ</em

Summary

我々は、特異的に発現される新規の赤色蛍光タンパク質（RFP）レポーターの説明<em>ショウジョウバエ</em>目。私たちは、細部目成虫原基の解離のための方法論をどのようにこの記者は、解剖、発展途上の目で特定の細胞型の同定を支援するために使用することができます。

Abstract

市販<em>ショウジョウバエ</em>目には神経発生、シグナル伝達と神経変性などの分野を研究するための強力なモデルシステムです。このシステムを使用して行ったの発見の多くは発展途上の目成虫原基における視細胞分化の時空間的性質の利用しています。このシステムを使用するには、それは目のディスクを識別し、解剖することを学ぶために研究者のためにまず必要です。私たちは、目のディスクと発展途上眼内の特定の細胞型の可視化の同定に役立つように新たなRFPのレポーターを説明します。我々は詳細三齢幼虫から目成虫原基の解離のための方法論を、目をRFPのレポーターはこの解剖に役立てることができる方法について説明します。この目- RFPのレポーターは、目で表され、信号の増幅を必要とせずに生きている組織、あるいは固定後、蛍光顕微鏡を用いて可視化することができます。我々はまた、このレポーターが目のディスク内の特定のセルのタイプを識別するために使用できる方法を示します。このプロトコルと目RFPレポーターの使用は、使用して研究者を支援します<em>ショウジョウバエ</em根本的に重要な生物学的な問題に対処するために>目。

Protocol

<ol><li>まず場所解剖顕微鏡下Sylgard皿にPBSのドロップ。</li><li>次のスパチュラを用いてバイアルやボトルからいくつかの放浪三齢幼虫を除去し、PBS中に置いてください。</li><li>解剖は、幼虫の後部に向かって3分の2を把握してから前方端に濃い色の口のフックを保持するために他のペアを使用する（あなたは右利きの場合）左手のピンセットを使用開始する。</li><li>今すぐ静かに互いから離れ?…

Discussion

ショウジョウバエの眼成虫のディスクの解離は簡単ですが、マスターに時間がかかることがあります。重要なステップは、離れて幼虫脳から目のディスクとその解剖の同定です。目のディスクの識別は、眼- RFPのラインは、ここで説明を使用して容易になります。実行可​​能な変更は、触角ディスクまたはperipodial膜を除去する、または脳に入るPRの軸索を可視化するために接続され?…