一种新型的RFP的记者，以帮助在眼成虫光盘的可视化果蝇</em

Summary

我们描述了一种新型红色荧光蛋白（RFP）的记者，具体表现在<em>果蝇</em>眼睛。我们详细解剖眼成虫光盘的方法，以及如何记者可用于援助在解剖和鉴定特定的细胞类型，在发展中国家的眼睛。

Abstract

“<em>果蝇</em>眼睛是一个功能强大的模型系统研究，如神经元的信号转导和神经退行性疾病领域。许多的发现，使用此系统已在发展中国家眼成虫光盘的感光细胞分化的时空性质的优势。要使用这个系统，首先有必要为研究员，学会识别和剖析眼光盘。我们描述一个新的RFP的记者，以帮助确定眼睛的光盘和特定的细胞类型，在发展中国家的眼睛的可视化。我们详细解剖眼三龄幼虫的成虫盘的方法，并描述眼RFP的记者如何能帮助剥离。只表示这眼RFP的记者的眼睛，可在活组织或固定后的可视化使用荧光显微镜，而不需要进行信号放大。我们还展示了如何记者可以用来识别特定的细胞类型眼内盘。本议定书和眼RFP的记者使用，将有助于研究人员使用<em>果蝇</em>眼，从根本上解决重要的生物学问题。

Protocol

<ol><li>首先放置在解剖显微镜下的PBS下降到Sylgard菜。</li><li>下取出一小瓶或一瓶使用抹刀几个流浪第三龄幼虫，在PBS。</li><li>开始解剖用左手镊子（如果你是右撇子）掌握三分之二的方式对后，幼虫，然后使用另一对深色口钩举行前结束。</li><li>现在，轻轻一拉幼虫除了从镊子都对远离对方。的口器，应该从身体的其余部分附加的眼睛/大脑复杂。</li><li>放置30-45分钟就冰在4％多聚甲醛/ PBS液?…

Discussion

解剖果蝇眼睛成虫光盘很简单，但可以利用的时间掌握。关键步骤是确定眼睛的光盘和清扫远离幼虫大脑。眼盘的鉴定是比较容易的，使用这里描述的眼RFP的线。可能修改删除触角光盘或peripodial膜，或离开视叶附以可视化的公关轴突进入大脑。

眼RFP的路线是通过克隆产生特有的一种新型的眼睛^， 从2指出的P2基因的第二内含子增强剂的PRED的H -毒刺^增?…