Чтобы расширить возможности лабораторий во всем мире для оценки отбора пациентов с раком легких для лечения с pembrolizumab, на основе надежных и воспроизводимых, мы разработали assay который использует 22 c 3 антитела концентрата на широко доступны Иммуногистохимическая autostainer, для цитологии и биопсии образцов.
Монотерапия Pembrolizumab был утвержден на первой и второй линии лечения больных с PD-L1-выражая расширенный non-немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ). Тестирование для PD-L1 выражение с диагностики assay PD-L1 иммуногистохимия (IHC) 22 c 3 компаньон, который дает опухоль доля Оценка (TPS), была проверена на опухолевой ткани. Мы разработали оптимизированные лаборатории разработали тест (LDT), использующий 22 c 3 антитела (Ab) концентрат на широко доступны ИХС autostainer для цитологии и биопсии образцов. PD-L1 TPS оценивалась с 120 парных целом опухолевой ткани секций и биопсия и с 70 паре образцы биопсии и цитологии (бронхиальной Моет, n = 40; плеврального излияния, n = 30). Ab 22 c 3, на основе концентрата LDT показал высокий уровень согласованности между биопсии (~ 100%) и цитологии образцов (~ 95%), по сравнению с PD-L1 IHC выражение определено с помощью пробирного 22 c 3 компаньон PD-L1 IHC на обоих TPS сократить пунктов (≥1%, ≥50%). Оптимизированный LDT, представленные здесь, используя 22 c 3 Ab концентрат для определения выражения PD-L1 в обоих опухолевой ткани и цитологии образцов, будет расширяться лабораторий во всем мире возможность оценить отбора больных НМРЛ для лечения с Монотерапия pembrolizumab на основе надежных и воспроизводимых.
Последние клинические исследования продемонстрировали эффективность pembrolizumab, гуманизированные моноклональные IgG4 Каппа isotype антитела которое блокирует взаимодействие между запрограммированной смерти клетки 1 (PD-1) и ее лигандов, PD-L1 и PD-L2, в лечении больных с Расширенные НМРЛ1,2,3,4.
В настоящее время pembrolizumab одобрен для лечения НМРЛ PD-L1-выражая в обоих лечения наивно пациентов с выражением PD-L1 TPS ≥50% и не рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) или Анапластическая лимфомы киназы (ALK) геномных опухоли аберраций3 и для ранее лечение пациентов с TPS PD-L1 ≥1%1.
PD-L1 белка выражение определяется IHC широко используется как assay интеллектуального биомаркеров для терапии анти PD-1/PD-L1. В клинических испытаниях pembrolizumab TPS PD-L1, полученные с формалином Исправлена парафин врезанных образцов ткани (FFPE) было определено с помощью анализа компаньон PD-L1 IHC 22 c 35. Этот assay был одобрен в США продуктов питания и медикаментов (FDA) и был CE помечен в Европе для определения опухоли PD-L1 TPS5.
Дополнительные глобальные параметры через учреждения для надежных и качественных оценок PD-L1 TPS с LDTs, которые используют концентрат 22 c 3 антитела необходимы для поддержки клинических решений относительно отбора пациентов для pembrolizumab лечение. Большое количество лабораторий патологии не имеют доступа к Компаньон диагностическое PD-L1 IHC 22 c 3 assay. Таким образом важно развитие надежных и последовательных LDTs совместим с дополнительными, широко доступны ИХС autostainer платформ.
Кроме того существует необходимость в создании LDTs с использованием цитологии образцов, которые являются только образец типа часто доступны от больных НМРЛ. PD-L1 IHC 22 c 3 компаньон пробирного проверяется для резекции, биопсия иглы ядро и бронхоскопии только если бронхоскопии дает 100 опухолевых клеток. Хотя выше типы пример часто получаются, цитологических мазков более легко собираются и являются наиболее широко доступен образец типа в некоторых учреждений6,7. Однако есть в настоящее время нет проверенных диагностических пробирного для оценки выражения PD-L1 в цитологических мазков; надежный LDTs совместим с цитологических мазков облегчило бы высокое качество тестирования PD-L1.
Кроме того при установлении клинические проверки LDT, ИГХ должны выполняться в подобным образом соответствующий клинически проверенных коммерческих тест8. Например чтобы получить тот же самый сигнал в серийный разделы, такие как антитела титрования, предварительной задержки, время инкубации и усиление систем9должны быть проверены несколько важных шагов.
Мы недавно разработали оптимизированные LDT, использующий 22 c 3 антитела концентрат для оценки выражения PD-L1 биопсий опухоли и цитологии образцы10,11. Мы нашли высоким согласования с LDT против «золотой стандарт» PD-L1 IHC 22 c 3 пробирного10,11. Этот клинически проверенных протокол будет поддерживать надежный, высококачественный PD-L1, тестирование в регионах во всем мире.
Мы подтвердили оптимизированный LDT, используя 22 c 3 PD-L1 антитела концентрат, сравнивая его с соответствующей клинически проверенных коммерческих тест10,11. 22 c 3 сосредоточены на основе антител LDT, показали высокий уровень согласования между образцы цитологи…
The authors have nothing to disclose.
Это исследование финансировалось Merck & Co., Inc., Москва, Нью-Джерси, США. Спонсоры играли никакой роли в дизайн исследования, сбор данных и анализ, решение опубликовать или подготовка рукописи.
NovaPrep HQ1 | Novacyt | NA | Preservative solution for cytology specimens |
Novaprep® HQ+ B | Novacyt | NA | Mucolytic solution |
Tissue-Tek VIP 6 | Sakura | 6042 VIP 6 | |
Tissue-Tek TEC 5 Tissue Embedding Console System | Sakura | 5229 TEC 5 | |
microscope glass slide SuperFrost Plus | Thermo Fisher Scientific | 4951PLUS4 | |
DL-Dithiothreitol powder | Sigma-Aldrich | D3801 | |
Heidolph Multi Reax Vortex Shaker | Thermo Fisher Scientific | 13-889-410 | |
Shandon Cytoblock | Thermo Fisher Scientific | 7401150 | |
22C3 anti-PD-L1 concentrate antibody | Agilent Dako | #M365329 | |
PD-L1 IHC 22C3 pharmDx | Agilent Dako | SK006 | |
Autostainer Link 48 | Agilent Dako | AS480 | |
BenchMark ULTRA autostainer | Ventana | #750-600 | |
OptiView HQ Universal Linker | Ventana | #760-700 | |
OptiView HRP Multimer | Ventana | #760-700 | |
OptiView Amplification H2O2 | Ventana | #760-099 | |
OptiView Amplifier | Ventana | #760-099 | |
OptiView Amplification Multimer | Ventana | #760-100 | |
OptiView DAB | Ventana | #760-700 | |
OptiView Copper | Ventana | #760-700 | |
Hematoxylin II | Ventana | #790-2208 | |
Bluing Reagent | Ventana | #760-2037 | |
Cell Conditioning 1 (CC1) | Ventana | #950-124 | |
Tissue-Tek Film Coverslipper | Sakura | 4742 |