22C 3를 사용 하 여 반대로 PD L1 항 체 생 검 및 비 작은 세포 폐 암 환자에서 세포학 샘플에 집중
Summary
안정적이 고 재현 가능한 방식으로 pembrolizumab, 치료에 대 한 폐암 환자의 자격을 평가 하는 전세계 실험실의 기능을 확장 하려면 우리 22C 3 항 체 집중에는 널리 사용 하는 분석 결과 개발 생 검과 세포학 표본에 대 한 immunohistochemical autostainer
Abstract
Pembrolizumab monotherapy PD-L1-표현 고급 비 작은 세포 폐암 (NSCLC) 환자의 첫 번째 및 두 번째 라인 치료에 대 한 승인 되었습니다. PD L1 식 PD L1 immunohistochemistry (IHC) 22C 3 동행자 진단 분석 결과 함께 테스트 점수 (TPS), 종양 조직에 검증 된 종양 비율을 제공 하. 우리는 최적화 된 실험실 개발 테스트 (LDT) 생 검과 세포학 표본에 대 한 널리 IHC autostainer에 22C 3 항 체 (Ab) 집중을 사용 하는 개발. PD L1 TPS 120 쌍된 전체 종양 조직 단면도 및 생 검 견본 평가 되었다 고 70 쌍 생 검 및 세포학 샘플 (기관지 세척, n = 40; 흉 울트라 바이올렛 effusions, n = 30). 집중 기반 LDT 보여주 세포학 생 (~ 100%)와 높은 색인 속도 (~ 95%) 표본 두 TPS에서 PD L1 IHC 22C 3 동반자 분석 결과 사용 하 여 결정 하는 PD L1 IHC 식에 비해 22C 3 Ab 컷 포인트 (≥1%, 50%). 22C 3 Ab 집중을 사용 하 여 두 종양 조직 및 세포학 표본, PD L1 식을 결정 하려면 여기, 최적화 된 LDT NSCLC 환자의 치료에 대 한 자격을 평가 하기 위해 실험실 전세계의 능력을 확장 됩니다. pembrolizumab monotherapy 안정적이 고 재현 가능한 방식입니다.
Introduction
최근 임상 시험 pembrolizumab는 인간 답게 단일 클로 널 IgG4 카파 isotype 항 체 (PD-1) 프로그램 된 세포 죽음 1 사이의 상호 작용을 차단 하 고 그것의 ligands, PD L1 및 l 2 PD 환자의 치료에서의 효능 입증 고급 NSCLC1,2,,34.
현재, pembrolizumab 두 치료 순진한 환자 50 %와 표 피 성장 인자 수용 체 (EGFR) 없거나 anaplastic 림프 종 키나 제 (ALK) 게놈 종양 착오3의 PD L1 식이 TPS에에서 PD L1 표현 NSCLC의 치료에 대 한 승인 이전에 대 한 ≥11의 PD L1 TPS와 환자 치료.
PD L1 단백질 표정 IHC에서 검색 널리 예측 바이오 마커 분석 결과로 안티-PD-1/PD-L1 요법를 사용 했다. Pembrolizumab 임상 시험에서 포 르 말린 고정 파라핀 포함 (FFPE) 조직 샘플으로 얻은 PD L1 TPS PD L1 IHC 22C 3 동반자 분석 결과5를 사용 하 여 결정 되었다. 이 분석 결과 미국 식품의 약 청 (FDA)에 의해 승인 되었습니다 하 고 종양 PD L1 TPS5의 결정에 대 한 유럽에서 CE 표시 되었습니다.
22C 3 항 체 집중 사용 LDTs와 PD L1 TPS의 안정적이 고 높은 품질 평가 기관에서 추가 글로벌 옵션 pembrolizumab에 대 한 환자 자격에 관한 임상 결정을 지원 하기 위해 필수적입니다. 치료입니다. 병 리 실험실의 많은 동행자 진단 PD L1 IHC 22C 3 분석 결과에 대 한 액세스를 필요가 없습니다. 따라서, 안정적이 고 일관 된 LDTs 호환, 널리 IHC autostainer 플랫폼의 개발은 필수적입니다.
또한, LDTs NSCLC 환자에서 자주 사용할 수 있는 유일한 견본 유형 세포학 샘플을 사용 하 여 설정할 필요가 있다. PD L1 IHC 22C 3 동반자 분석 결과 상계 100 종양 세포를 생성 하는 경우에 절제, 중 핵 바늘 생 검, 그리고 bronchoscopies에 대 한 유효성이 검사 됩니다. 위의 샘플 종류 자주 얻을 수 있습니다, 비록 세포학 샘플은 보다 쉽게 수집 되며 일부 기관6,7에 가장 일반적으로 사용 가능한 샘플 종류. 그러나, 현재는 아무 검증된 진단 분석 결과 세포학 샘플;에 PD L1 식의 평가에 사용할 수 있는 안정적인 LDTs 세포학 샘플와 호환 것 이다 더 높은-품질 PD L1 테스트 용이 하 게.
또한,는 LDT의 임상 유효성 검사를 설정 하는 경우는 IHC 해당 임상 검증 된 상용 테스트8에 유사한 방법으로 수행 되어야 한다. 예를 들어, 몇 가지 중요 한 단계는 항 체 적정, 전처리 지연, 보육 시간, 증폭 시스템9등 직렬 섹션에 동일한 신호를 확인 되어야 한다.
우리는 최근 22C 3 항 체 집중 종양 생 검 및 세포학 샘플10,11PD L1 식을 사용 하 여 최적화 된 LDT를 개발 했다. 우리는 LDT 대 “금 표준” PD L1 IHC 22C 3 분석 결과10,11와 높은 일치 발견. 이 임상 검증된 프로토콜 신뢰할 수 있는, 높은-품질 PD L1 세계적으로 지역 전역에 걸쳐 테스트를 지원 합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
우리 22C 3 PD L1 항 체 집중을 사용 하 여 해당 임상 검증 된 상용 테스트10,11에 그것을 비교 하 여 최적화 된 LDT를 확인 했습니다. 22C 3 집중 항 체 기반 LDT 생 (~ 100%)과 세포학 (~ 95%) 표본 ≥1 %TPS 50% 포인트 인하 하는 TPS에서 PD L1 IHC 22C 3 분석 결과 사용 하 여 결정 하는 PD L1 IHC 식에 비해 사이 높은 일치 율을 보였다. 최근 폐암의 연구에 대 한 국제 협회에 의…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 머 크 & 주식, Inc., 케 닐 워스, 뉴저지, 미국에 의해 후 원했다. Funders 연구 설계, 데이터 수집 및 분석, 결정 게시 또는 원고의 준비에 아무런 역할을 했다.
Materials
| NovaPrep HQ1 | Novacyt | NA | Preservative solution for cytology specimens |
| Novaprep® HQ+ B | Novacyt | NA | Mucolytic solution |
| Tissue-Tek VIP 6 | Sakura | 6042 VIP 6 | |
| Tissue-Tek TEC 5 Tissue Embedding Console System | Sakura | 5229 TEC 5 | |
| microscope glass slide SuperFrost Plus | Thermo Fisher Scientific | 4951PLUS4 | |
| DL-Dithiothreitol powder | Sigma-Aldrich | D3801 | |
| Heidolph Multi Reax Vortex Shaker | Thermo Fisher Scientific | 13-889-410 | |
| Shandon Cytoblock | Thermo Fisher Scientific | 7401150 | |
| 22C3 anti-PD-L1 concentrate antibody | Agilent Dako | #M365329 | |
| PD-L1 IHC 22C3 pharmDx | Agilent Dako | SK006 | |
| Autostainer Link 48 | Agilent Dako | AS480 | |
| BenchMark ULTRA autostainer | Ventana | #750-600 | |
| OptiView HQ Universal Linker | Ventana | #760-700 | |
| OptiView HRP Multimer | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Amplification H2O2 | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplifier | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplification Multimer | Ventana | #760-100 | |
| OptiView DAB | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Copper | Ventana | #760-700 | |
| Hematoxylin II | Ventana | #790-2208 | |
| Bluing Reagent | Ventana | #760-2037 | |
| Cell Conditioning 1 (CC1) | Ventana | #950-124 | |
| Tissue-Tek Film Coverslipper | Sakura | 4742 |
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