アンチ PD L1 抗体は生検で非小細胞肺癌患者からの細胞のサンプル集中 22 3 を使用して
Summary
信頼性が高く、再現性のある方法で、pembrolizumab の治療のための肺癌症例の適格性を評価するために世界中の研究所の能力を展開し、我々 は広く使用可能な 22 3 抗体濃縮液を使用してアッセイを開発しました。生検と細胞診標本の免疫組織化学的オスミウム。
Abstract
Pembrolizumab 単独療法は、PD-L1-を表現する高度な非小細胞肺癌 (NSCLC) 患者の最初とセカンド ライン治療に承認されています。PD L1 式 PD L1 免疫組織染色 (IHC) 22 3 コンパニオン診断アッセイのテスト、腫瘍の割合を与えるスコア (TP)、腫瘍組織で検証済み。最適化研究室開発 (LDT) を使用するテスト 22 3 抗体 (Ab) 集中広く利用可能な IHC オスミウムの生検と細胞診標本を開発しました。PD L1 TPS 120 ペア全体腫瘍切片と生検を行ったし、70 を組み合わせて、生検や細胞診のサンプル (気管支洗浄、 n = 40; 胸水, n = 30)。22 3 は濃縮ベース LDT を示した細胞診と生検 (~ 100%) との間の一致率が高い (~ 95%) 標本両方 TPS の PD L1 IHC 22 3 コンパニオン アッセイを用いて PD L1 IHC 式と比較した場合はポイント (≥ 1%: 50%) をカットします。今回紹介した最適化された LDT 22 3 Ab 集中を使用して両方の腫瘍、細胞診、PD L1 式を決定する治療の非小細胞肺癌患者の適格性を評価するために世界中の研究所の能力を拡大します。信頼性が高く、再現性のある方法で単独で pembrolizumab。
Introduction
最近の臨床試験は、ヒト化モノクローナル IgG4 カッパ アイソタイプの抗体 (PD 1) プログラムされた細胞死 1 間の相互作用をブロックする pembrolizumab とその有機配位子、PD L1 と L2-PD 患者の治療の有効性を実証しています。高度な非小細胞肺癌1,2,3,4。
50% や上皮成長因子受容体 (EGFR) や未分化リンパ腫キナーゼ (アルク) ゲノム腫瘍異常3 の PD L1 式 TPS 両方未治療患者の PD L1 表現する非小細胞肺癌の治療のための pembrolizumab の承認現在、以前の PD L1 TPS ≥ 11の患者を治療。
IHC によって検出された PD L1 蛋白質の表現は、アンチ-PD-1/PD-L1 治療予測バイオ マーカーのアッセイとして広く使用されています。Pembrolizumab 臨床試験で、ホルマリン固定パラフィン包埋 (FFPE) 組織サンプルで得られた PD L1 TPS は PD L1 IHC 22 3 コンパニオン試金5を使用して決定しました。この試金は米国食品医薬品局 (FDA) によって承認されているし、PD L1 TPS5腫瘍によるヨーロッパの CE-マークされています。
LDTs 22 3 抗体濃縮液を使用すると PD L1 TPS の信頼性の高い、高品質の評価のための機関間で追加のグローバル オプションが pembrolizumab の患者の適格性に関する臨床決断をサポートする重要です治療。病理学研究所の大規模な数には、コンパニオン診断 PD L1 IHC 22 3 試金へのアクセスがありません。したがって、信頼性と一貫性のある LDTs 広く利用可能な追加の IHC オスミウム プラットフォームと互換性の開発は不可欠です。
また、非小細胞肺癌患者から頻繁に利用できる唯一の検体の種類は、細胞診サンプルを使用して LDTs を確立する必要があります。気管支腫瘍細胞の 100 が得られます場合にのみ、bronchoscopies、コア針生検、切除 PD L1 IHC 22 3 コンパニオン アッセイが検証されます。上記サンプルの型が得られる頻度が細胞診サンプルより簡単に収集される、いくつかの機関6,7で最も一般的なサンプル タイプです。ただし、現在ありません検証診断アッセイ細胞診サンプルで PD L1 の式の評価に使用できます。細胞診サンプルと互換性のある信頼性の高い LDTs はさらに高品質な PD L1 テストを促進でしょう。
さらに、LDT の臨床的検証を設定した場合、IHC は対応する臨床的に検証された商業テスト8と同様の方法で実行必要があります。例えば、抗体価、溶銑予備処理の遅延、インキュベーション時間増幅システム9などシリアル セクションで同じ信号を取得するいくつかの重要な手順を検証すべき。
我々 は最近、腫瘍生検と細胞診サンプル10,11PD L1 の式を評価する 22 3 抗体濃縮液を使用する最適化された LDT を開発しました。LDT対「ゴールド スタンダード」PD L1 IHC 22 3 試金10,11と高い一致を発見しました。この臨床的に検証されたプロトコルは、信頼性の高い、高品質 PD-L1 グローバル領域でのテストをサポートします。
Protocol
Representative Results
Discussion
対応する臨床的に検証された商用試験10,11と比較して 22 3 PD L1 抗体濃縮を使用して最適化された LDT を検証しました。22 3 には、生検 (~ 100%) と (~ 95%) 細胞診 ≥ 1 %tps で: 50% カット ポイント TPS PD L1 IHC 22 3 アッセイを用いて PD L1 IHC 式に比べて高い一致率を示した抗体を用いた LDT が集中しています。最近肺がんの研究のための国際協会によって推奨ど…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、米国ニュージャージー州ケニルワース ・株式会社メルク社によって主催されました。資金提供者は研究デザイン、データの収集と分析、意思決定を発行し、または原稿の準備で役割を果たしていません。
Materials
| NovaPrep HQ1 | Novacyt | NA | Preservative solution for cytology specimens |
| Novaprep® HQ+ B | Novacyt | NA | Mucolytic solution |
| Tissue-Tek VIP 6 | Sakura | 6042 VIP 6 | |
| Tissue-Tek TEC 5 Tissue Embedding Console System | Sakura | 5229 TEC 5 | |
| microscope glass slide SuperFrost Plus | Thermo Fisher Scientific | 4951PLUS4 | |
| DL-Dithiothreitol powder | Sigma-Aldrich | D3801 | |
| Heidolph Multi Reax Vortex Shaker | Thermo Fisher Scientific | 13-889-410 | |
| Shandon Cytoblock | Thermo Fisher Scientific | 7401150 | |
| 22C3 anti-PD-L1 concentrate antibody | Agilent Dako | #M365329 | |
| PD-L1 IHC 22C3 pharmDx | Agilent Dako | SK006 | |
| Autostainer Link 48 | Agilent Dako | AS480 | |
| BenchMark ULTRA autostainer | Ventana | #750-600 | |
| OptiView HQ Universal Linker | Ventana | #760-700 | |
| OptiView HRP Multimer | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Amplification H2O2 | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplifier | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplification Multimer | Ventana | #760-100 | |
| OptiView DAB | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Copper | Ventana | #760-700 | |
| Hematoxylin II | Ventana | #790-2208 | |
| Bluing Reagent | Ventana | #760-2037 | |
| Cell Conditioning 1 (CC1) | Ventana | #950-124 | |
| Tissue-Tek Film Coverslipper | Sakura | 4742 |
References
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