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Knockdown condicional de expressão gênica em linhas de células de câncer para estudar o recrutamento de monócitos/macrófagos para o microambiente do Tumor
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JoVE Journal Cancer Research
Conditional Knockdown of Gene Expression in Cancer Cell Lines to Study the Recruitment of Monocytes/Macrophages to the Tumor Microenvironment

Knockdown condicional de expressão gênica em linhas de células de câncer para estudar o recrutamento de monócitos/macrófagos para o microambiente do Tumor

DOI:
10.3791/56333-v

•

10:59 min

•

November 23, 2017

•

,
1Division of Hematology, Oncology and Blood and Marrow Transplantation, Department of Pediatrics,University of Southern California, 2The Saban Research Institute of Children’s Hospital Los Angeles, 3Department of Biochemistry and Molecular Medicine,University of Southern California

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:09Generation of Lentivirus Particles
  • 02:34Generation of Stably Transfected Lines
  • 04:55Isolation of Monocytes from Human Blood
  • 08:00Boyden Chamber Migration Assay
  • 09:25Results: PAI-1 Promotes Macrophage Migration
  • 10:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Este protocolo serve como um esquema para a criação de um sistema funcional de Tet-ON em linhas de células de câncer e sua utilização posterior, em especial para estudar o papel das proteínas derivado de células de tumor no recrutamento de monócitos/macrófagos para o microambiente do tumor.

Tags

Conditional Gene KnockdownCancer Cell LinesMonocyte RecruitmentMacrophage RecruitmentTumor MicroenvironmentLentiviral TransductionHEK-293 CellsHCT-116 CellsMDA-MB-231 CellsMonocyte PurificationPuromycin Selection

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