Hier presenteren we een protocol van heterotopische aorta transplantatie in muizen met behulp van de niet-hecht manchet techniek in een cervicale Murine model. Dit model kan worden gebruikt om de onderliggende pathologie van chronische transplantaat vasculopathie (CAV) te bestuderen en kan helpen bij het evalueren van nieuwe therapeutische middelen om de vorming ervan te voorkomen.
Met de introductie van krachtige immunosuppressieve protocollen, zijn duidelijke vooruitgang mogelijk in de preventie en therapie van acute afwijzing afleveringen. In de afgelopen decennia kon echter slechts geringe verbetering van de lange termijn resultaten van getransplanteerde vaste organen worden waargenomen. In deze context vertegenwoordigt chronische transplantaat vasculopathie (CAV) nog steeds de belangrijkste oorzaak van laat-orgaanfalen bij cardiale, nier-en pulmonaire transplantatie.
Tot dusver blijft de onderliggende pathogenese van CAV-ontwikkeling onduidelijk, waarin wordt uitgelegd waarom effectieve behandelingsstrategieën momenteel ontbreken en de nadruk leggen op een behoefte aan relevante experimentele modellen om de onderliggende pathofysiologie te bestuderen die leidt tot CAV vorming. Het volgende protocol beschrijft een heterotope cervicale aorta transplantatie model Murine met behulp van een gemodificeerde niet-hecht manchet techniek. In deze techniek wordt een segment van de thoracische aorta in de rechter gemeenschappelijke halsslagader geplaatst. Met het gebruik van de niet-hecht manchet techniek, kan een gemakkelijk te leren en reproduceerbare model worden vastgesteld, waardoor de mogelijke heterogeniteit van gehecht vasculaire micro anastomoses wordt geminimaliseerd.
In de afgelopen zes decennia is een solide orgaantransplantatie geëvolueerd van een experimentele procedure naar een standaard van zorg voor de behandeling van eindstadium orgaanfalen1. Als gevolg van de verbetering van antimicrobiële middelen, chirurgische technieken en vooruitgang in immunosuppressieve regimenten, de vroege succespercentage van de vaste orgaantransplantatie zijn aanzienlijk toegenomen in de afgelopen decennia2.
Echter, lange termijn transplantaat overleving percentages zijn niet significant verbeterd op dezelfde manier3. De ontwikkeling van CAV is de belangrijkste factor die de lange termijn Overleving4,5,6beperkt. Deze pathologie wordt gekenmerkt door de vorming van een concentrische neointimale laag bestaande uit gladde spiercellen, wat leidt tot progressieve vernauwing van het vat en opeenvolgende malperfusie van het getransplanteerde vaste orgaan. Bij ontvangers van harttransplantaties kunnen CAV laesies worden gediagnosticeerd bij maximaal 75% van de patiënten 3 jaar na transplantatie7.
De pathofysiologie van CAV is nog niet volledig begrepen. Het lijkt te zijn gerelateerd aan tal van immunologische en niet-immunologische factoren, leidt tot endotheliale schade met daaropvolgende endotheliale activering en dysfunctie8. Tot dusver bestaat er geen causale behandelingsoptie voor de preventie van CAV, met de nadruk op de noodzaak van een reproduceerbare kleine diermodel om de vorming en mogelijke therapie van CAV te bestuderen.
Met het gebruik van muriene aorta transplantatie modellen, CAV achtige laesies kan worden gezien 4 weken na transplantatie. Deze laesies bestaan voornamelijk uit vasculaire gladde spiercellen, daardoor, die lijken op de menselijke pathologie. Door een breed scala aan transgene en knock-out muizen biedt het gebruik van Muismodellen in transplantatie geassocieerde pathologieën een unieke kans om nieuwe therapeutische opties te identificeren en hun ontwikkeling te begrijpen. Vanwege de kleine diameter van de getransplanteerde vaten wordt het gebruik van Muismodellen echter vaak geassocieerd met lange leer curves en een initiële hoge complicatie rate9. Met de introductie van de niet-hecht manchet techniek kan dit meest uitdagende deel van de operatie worden vergemakkelijkt en wordt de diameter van de anastomose constant10,11gehouden.
Chronische allotransplantaat vasculopathie is de belangrijkste oorzaak van laat transplantaat verlies na een solide orgaantransplantatie van het hart en waarschijnlijk nier-en Long allograften8. Tot nu toe kon geen causaal therapeutisch regime worden ontwikkeld om de vorming van CAV te voorkomen.
De pathofysiologie van CAV is multifactoriaal en omvat immunologische en niet-immunologische aspecten16. Het gebruik van knaagdieren modellen bij transp…
The authors have nothing to disclose.
Geen.
Balb-c Mice (H2-d) | Charles River | Strain# 028 | Donor animal |
Bipolar cautery system | ERBE | ICC 50 / 20195-023 | Bipolar cautery |
C57BL/6J (H-2b) | Charles River | Strain# 027 | Recipient animal |
Halsey Needle Holders | FST | 12501-12 | Needle Holder |
Halsted-Mosquito Forceps | AESCULAP | BH111R | Curved Clamp |
Medical Polyimide Tubing | Nordson MEDICAL | 141-0031 | Cuff-Material |
Micro Serrefines | FST | 18055-04 | Micro Vessel Clip |
Micro-Adson Forceps (serrated) | FST | 11018-12 | Standard Forceps |
Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps | FST | 18057-14 | Clipapplicator |
S&T Forceps – SuperGrip Tips (Angled 45°) | S&T | 00649-11 | Fine Forceps |
S&T Vessel Dilating Forceps – Angled 10° (Tip diameter 0.2 mm) | S&T | 00125-11 | Vesseldilatator |
Schott VisiLED Set | Schott | MC 1500 / S80-55 | Light |
Stereoscopic microscope | ZEISS | SteREO Discovery.V8 | Microscope |
Student Fine Scissors / Surgical Scissors – Sharp-Blunt | FST | 91460-11 / 14001-12 | Standard Sissors |
Vannas-Tübingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm) | FST | 15004-08 | Microsissors (curved) |
Vannas-Tübingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm) | FST | 15003-08 | Microsissors (straight) |