Summary

yetiştirme<em> Geyik kenesi,</em> Siyah Ayaklı Tik Tak: Fare üzerinde Olgunlaşmamış Evreleri Besleme

Published: May 08, 2017
doi:

Summary

Sağlıklı laboratuarda yetiştirilen kenelerin üretimi, kene biyolojisi ve kene patojen etkileşimleri üzerine çalışmalar için gereklidir. Burada, fare için düşük maliyetli ve stresli olgunlaşmamış kene beslemesi için basit bir protokolü gösteriyoruz.

Abstract

Lyme hastalığının vektörü Ixodes scapularis , doğu ve orta batı Amerika Birleşik Devletleri'ndeki en önemli hastalık vektörlerinden biridir. Bu tür, her gelişim evresi için bir omurgalı konakçıdan bir kan yemek isteyen üç ana kene ve yetişkin dişiler üreme için kan dolumu gerektirir. Larval keneler beslenmek için ev sahibine 3 – 5 gün boyunca bağlarlar ve evin tamamen tıkıldıktan sonra bırakırlar. Birkaç farklı konağa bağımlılık ve engorgement için uzun ekleme zamanı, laboratuar ortamında kenelerin yetiştirilmesini zorlaştırır. Bununla birlikte, kene biyolojisi ve kene-patojen etkileşimlerini anlamak için sağlıklı, laboratuar bakımlı kenelerin üretimi önemlidir. Burada, farelerde olgunlaşmamış kene beslemeye yönelik basit ve uygun maliyetli bir protokol gösteriyoruz. Farelerde azaltılmış stres için varolan protokolleri değiştirdik ve kenelerin temas etmesini önlemek için örgü dipleri olmayan tek kullanımlık kafesleri kullanarak kene besleme başarısı ve hayatta kalma oranını arttırdık.İdrar ve dışkılarla kirlenmiş su.

Introduction

Keneler omurgalıların zorunlu hematophagous ektoparazitlerdir ve dünya çapında dağıtılmaktadır. Amerika Birleşik Devletleri'nde, kenelerin en az 11 türün halk sağlığı önemi 1'in patojenlerin vektörler bulunmaktadır. Ixodes scapularis, Lyme hastalığı (Borrelia burgdorferi) ateş (B. miyamotoi) nükseden, insan granülosit anaplazmoz (Anaplasma phagocytophilum) ve babeziyoz neden olan maddeler olarak çeşitli patojenlerin iletiminden sorumludur (Babesia spp.). Laboratuvarda çalışmalar için vahşi bolca bu arachnids toplama bir hastalık vektörü olarak I. scapularis önemine rağmen her zaman mümkün değildir. Bu nedenle, sağlıklı laboratuvarda yetiştirilmiş kene üretimi kene biyolojisi üzerinde çalışmalar çok önemlidir ve etkileşimleri-patojen işaretleyin.

I. scapularis dahil tüm sert keneler (aile Ixodidae), yaşam döngüsü, yumurta ve üç activ oluşurE aşamaları: larva, nimf ve yetişkin. Her aktif aşamada bir omurgalı konakçı beslenir. Bağlar ve besleme birkaç gün içinde keneler ve onların konak arasında gerçekleşen karmaşık etkileşimler yapay besleyiciler kullanarak çoğaltmak için neredeyse imkansızdır ve 2 , 3 , 4 toplu yetiştirme için yeterli sayıdaki beslemiş kenelerin sağlanması pek olası değildir. Dolayısıyla, canlı fareler ve tavşanlar en sık olgunlaşmamış (larvalar ve nimfler) yetiştirme ana bilgisayarları ve tavukların olgun aşamaları (yetişkinler) olarak kullanılır. Her gelişim evresi boyunca kan beslemeye yönelik çoklu konut gereksinimi, kenelerin yetiştirilmesini zorlaştırmaktadır ve zaman ve maliyet yoğun 5 , 6 , 7 . Çoğu kene destekleme protokolleri, fareleri asma tel ızgara taban kafesindeki 7 , 8 ya da silindirik bir kabin içinde tutmayı gerektirirHayvan öyle boyutlara sahip ki, hayvan serbestçe hareket edemez ve kendini damatlayamaz 6 , 9 , 10 .

Bu silindirik kafesler daha sonra bir tel örgü ile bir ayakkabı kutusu kafesine aktarılır. Sızdırılmış, ayrılmış keneler altındaki sudan toplanır. Bununla birlikte, bu yöntem, beslenen kenelerin, idrar ve dışkı ile kirlenmiş mantar büyümesini ve kene ölüm oranını artırabilecek suya maruz kalmasına neden olur. Buna ek olarak, kene su çukurundan kaçma ve aynı zamanda farelere stres yaratma olasılığını artırır. Bu sorunları gidermek için, burada plastik ayakkabı kutusu tipi tek kullanımlık kafeslerdeki farelerde larval kene beslemeyi göstermektedir. Bu yöntem, farelerin normal davranışına izin verir, tıkanmış tıkanıklığı artırır ve kontaminasyondan ötürü kene ölümünü azaltır.

Protocol

aşağıda özetlenen protokolü (Sayı-00682) Nevada Reno Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış ve Nevada, Reno hayvan araştırma etik komitesi Üniversitesi kurallarına uygun olduğundan. Kısaca, fareler izofluran ile anestezi uygulandı ve burunluk 20 dakika süre ile devamlı izofluran düzeylerini muhafaza için kullanılmıştır. Bir veteriner merhem anestezi altında gözlerin kurumasını önlemek için kullanılmıştır. Ayak tutam anestezi seviyesini t…

Representative Results

Geliştirilmiş besleme etkinliği ve fare konak üzerinde stresin azaltılması için mevcut kenot yetiştirme protokolleri 6 , 10'u değiştirdik. Sonuçlar, standart ayakkabı kutusu tarzı fare kafeslerinin, kenelerin yetiştirilmesi için çok uygun olduğunu ortaya koymaktadır. Beyaz yatak, beslenen kenelerin kolay toplanması için iyi bir kontrast sağladı. Çoğu keneler, beslendikten sonra kapların duvarlarına t…

Discussion

Protokolün Kritik Adımları

Kazara kaçmayı önlemek için kenevir yetiştirirken birkaç güvenlik seviyesine sahip olmak önemlidir. Yapışkan bant ve su hendeği kullanımı, güvenliği sağlamak için kritik öneme sahiptir. Vücut ısısını sabit tutmak için anestezi uygulanmış fareyi ısıtma pedinde tutmak önemlidir. Fareyi tıraş etmenin kene ataşmanı için herhangi bir ek fayda sağlamadığını da bulduk. Bireysel bir fare, belirlenen bir "kene odası" nda bir…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.

Materials

Puralube vet ointment Amazon Available from any Pet store or online store
Disposable mouse cage  Innovive, San Diego, CA  MV 2 Set of bottom and lid
White Alpha dri bedding  Lab Supply, Fort Worth, TX  ALPHA-Dri™

References

  1. Gleim, E. R., et al. Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA. Parasites &amp; Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).
  2. Krober, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).
  3. Kuhnert, F. Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides. ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).
  4. Voigt, W. P., et al. In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium. Parasitol. 107, 257-263 (1993).
  5. Gregson, J. D., Smith, C. N. Ticks. Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).
  6. Sonenshine, D. E. . Biology of Ticks. 2, (1993).
  7. Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting. Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).
  8. Schumaker, T. S., Barros, D. M. Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory. J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).
  9. Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).
  10. James, A. M., Oliver, J. H. Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).

Play Video

Cite This Article
Nuss, A. B., Mathew, M. G., Gulia-Nuss, M. Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice. J. Vis. Exp. (123), e55286, doi:10.3791/55286 (2017).

View Video