Summary

飼育<em> Ixodes肩甲骨、</em>ブラック・ティック・ティック:未熟期をマウスに与える

Published: May 08, 2017
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Summary

健康的な実験室飼育の生産は、ダニの生物学の研究、およびダニ病原体相互作用に不可欠であるダニ。ここでは、費用対効果およびマウスにストレスの少ないです未熟ダニ供給のための単純なプロトコルを示しています。

Abstract

マダニのscapularis、ライム病のベクトルは、東部と中西部米国で最も重要な病気のベクトルのうちの1つです。この種は、各開発段階のための脊椎動物宿主からの血液の食事を必要とする3つのホストダニで、成人女性は、再生のための血液の食事を必要とします。給餌のための5日間、完全に充血したときにホストを降ろし – 幼虫は3のために自分のホストに接続ティック。いくつかの異なるホスト上のこの依存性や充血のための長い添付ファイルの時間は、実験室の設定で飼育ダニを複雑にします。しかし、生物学をダニやダニ – 病原体相互作用を理解するために、健康、研究室飼育の生産が不可欠であるダニ。ここでは、マウスを餌未熟ダニのための簡単な、費用対効果の高いプロトコルを示しています。我々は、マウスで減少し、ストレスのための既存のプロトコルを変更し、ダニのwiの接触を避けるために、メッシュボトムなし使い捨てケージを使用して、成功と生存を供給増加ダニマウスの尿や糞で汚染された水。

Introduction

ティックは、脊椎動物の必須の赤血球性外部寄生虫であり、世界中に分布している。米国では、少なくとも11種のダニは公衆衛生上重要な病原菌のベクターである1Ixodes肩甲介は、ライム病( Borrelia burgdorferi )再発熱( B. miyamotoi)、ヒト顆粒球アナプラズマ症( Anaplasma phagocytophilum )、およびバベシア症(Babesia spp。)の原因物質のようないくつかの病原体の伝達に関与する。疾病ベクターとしての肩甲介の重要性にもかかわらず、研究室での研究のためにこれらのクモ形類を野生から豊富に収集することは、必ずしも実現可能ではない。したがって、健全な実験室で飼育されたダニの生産は、ダニ生物学およびダニ病原体の相互作用に関する研究にとって不可欠である。

I. scapularisを含むすべての硬ダニ(Ixodidae科)の生活環は、卵と3つの活性成分eステージ:幼虫、ニンフ、および成体。各活性段階は、脊椎動物の宿主に供給される。付着と摂食の数日にわたってダニとその宿主との間で起こる複雑な相互作用は人工フィーダーを用いて複製することはほとんど不可能であり、大量飼育のために十分な数の飼養されたダニを提供する可能性は低い2、3、4 。したがって、生きたマウスおよびウサギは、未成熟(幼虫および幼虫)およびダニの成熟段階(成虫)をそれぞれ飼育するための宿主として最も頻繁に使用される。各発達段階の間に複数の宿主が血液供給のために必要であるため、ダニの飼育が複雑になり、時間とコストが掛かる5,6,7。ほとんどのダニ飼育プロトコルでは、マウスを吊り下げられたワイヤーグリッドの床ケージ7,8または円筒状のカード動物は自由に移動し、それ自体6、9、10グルーミングすることができないような寸法のGE。

これらの円筒形のケージは、後のワイヤグリッドで靴箱ケージに転送されます。充血し、剥離ダニは、次いで下水から収集されます。しかし、連邦準備制度を露光におけるこの方法の結果は、真菌の増殖を増加させ、死亡率9をチェックすることができ、尿及び糞便で汚染された水ティック。また、ダニ水トラフから脱出、ならびにマウスにストレスを引き起こす可能性が高くなります。これらの問題を回避するために、我々はここではプラスチック製の靴箱型の使い捨てケージ内でマウスの幼虫ダニの摂食を示しています。この方法は、マウスの正常な動作を可能に充血ダニ回復を増加し、汚染によるダニの死亡率を減少させます。

Protocol

下記に概説プロトコル(数-00682)は、ネバダ大学リノ校で施設内動物管理使用委員会(IACUC)によって承認され、ネバダ大学、リノの動物研究倫理委員会のガイドラインに従っています。手短に言えば、マウスをイソフルランで麻酔し、ノーズコーンを20分間連続イソフルランレベルを維持するために使用しました。獣医軟膏は、麻酔下で、目の乾燥を防ぐために使用されました。つま先のピ…

Representative Results

我々は、改善された給電効率を既存のダニ飼育プロトコル6、10を変更し、マウス宿主へのストレスを低減します。結果は、標準的なシューボックススタイルのマウスのケージは、ダニの飼育に適していることを示しています。白い寝具は、供給されたダニの容易な収集のための良好なコントラストを提供します。ほとんど?…

Discussion

プロトコル内の重要なステップ

偶発的な逃げを避けるためにダニを飼育するときは、いくつかのレベルの安全対策が必要です。粘着テープと水面を使用することは、安全性を確保する上で重要です。体温を一定に保つために、麻酔したマウスをヒーティングパッド上に置くことが重要です。我々はまた、マウスをシェービングしても、ダニ付着のための特別な利益は得られ…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.

Materials

Puralube vet ointment Amazon Available from any Pet store or online store
Disposable mouse cage  Innovive, San Diego, CA  MV 2 Set of bottom and lid
White Alpha dri bedding  Lab Supply, Fort Worth, TX  ALPHA-Dri™

References

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Cite This Article
Nuss, A. B., Mathew, M. G., Gulia-Nuss, M. Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice. J. Vis. Exp. (123), e55286, doi:10.3791/55286 (2017).

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