تربية<em> اللبود الكتفي،</em> القراد الأسود أرجل: تغذية مراحل غير ناضجة على الفئران
Summary
إنتاج القراد المختبرية صحية القراد هو ضروري للدراسات على البيولوجيا القراد، والتفاعلات الممرض القراد. هنا علينا أن نبرهن على بروتوكول بسيط لتغذية غير ناضجة القراد الذي هو فعالة من حيث التكلفة وأقل إرهاقا للفئران.
Abstract
إيكسوديس كتفي ، ناقلات مرض لايم، هي واحدة من ناقلات الأمراض الأكثر أهمية في شرق وغرب الولايات المتحدة الأمريكية. هذا النوع هو ثلاثة مضيف القراد الذي يتطلب وجبة الدم من المضيف الفقاريات لكل مرحلة التطوير، والإناث البالغات تتطلب وجبة الدم للاستنساخ. القراد اليرقات تعلق على مضيفهم لمدة 3-5 أيام للتغذية وإسقاط قبالة المضيف عندما إنكورجيد تماما. هذا الاعتماد على العديد من المضيفين مختلفة ووقت المرفقة طويلة لالتحام يعقد تعقيد القراد في إعداد المختبر. ومع ذلك، لفهم علم الأحياء القراد والتفاعلات الممرض القراد، وإنتاج القراد صحية، والمختبرات تربيته أمر ضروري. هنا، علينا أن نبرهن على بروتوكول بسيط وفعالة من حيث التكلفة للقراد غير ناضجة التغذية على الفئران. قمنا بتعديل البروتوكولات القائمة لانخفاض الضغط على الفئران وزيادة القراد نجاح التغذية والبقاء على قيد الحياة باستخدام أقفاص المتاح دون قيعان شبكة لتجنب الاتصال من القراد وايث المياه الملوثة مع الفئران البول والبراز.
Introduction
القراد والطفيليات الخارجية لدم تلزم من الفقاريات وتوزع في جميع أنحاء العالم. في الولايات المتحدة، لا يقل عن 11 نوعا من القراد هي ناقلات الجراثيم ذات الأهمية للصحة العامة 1. اللبود الكتفي هو المسؤول عن نقل العديد من مسببات الأمراض مثل العوامل المسببة للمرض لايم (بوريليا برغدورفيرية) الحمى الراجعة (B. miyamotoi)، anaplasmosis المحببات البشري (Anaplasma phagocytophilum)، والبابيزيا (بابيزيا النيابة.). وعلى الرغم من أهمية I. الكتفي بمثابة ناقلات الأمراض، وجمع هذه العناكب في وفرة من البرية للدراسات في المختبر ليست دائما ممكنة. ولذلك، فإن إنتاج القراد تربى مختبر صحي ضروري لدراسات في علم الأحياء القراد، والتفاعلات الممرض القراد.
دورة حياة كل القراد الصلب (الأسرة اللبوديات)، بما في ذلك I. الكتفي، تتكون من البيض وثلاثة أكتيفe مراحل: اليرقة، الحورية، والكبار. تتغذى كل مرحلة نشطة على مضيف الفقاريات. التفاعلات المعقدة التي تحدث بين القراد ومضيفيهم على مدى عدة أيام من التعلق والتغذية يكاد يكون من المستحيل تكرار باستخدام المغذيات الاصطناعية، ومن غير المرجح أن توفر ما يكفي من الأرقام من القراد تغذية للتربية الجماعية 2 ، 3 ، 4 . لذلك، يتم استخدام الفئران الحية والأرانب في كثير من الأحيان كمضيفات لتربية غير ناضجة (اليرقات والحوريات)، ومراحل ناضجة (البالغين) من القراد، على التوالي. متطلبات مضاعفات متعددة لتغذية الدم خلال كل مرحلة تنموية تعقيد زراعة القراد، وهو الوقت والتكلفة مكثفة 5 ، 6 ، 7 . تتطلب معظم بروتوكولات تربية القراد حفظ الفئران في قفص الطابق شبكة الأسلاك المعلقة 7 ، 8 أو في كا أسطوانيغي من هذه الأبعاد أن الحيوان لا يمكن أن تتحرك بحرية والعريس نفسه 6 ، 9 ، 10 .
يتم نقل هذه الأقفاص أسطوانية في وقت لاحق إلى قفص الأحذية مع شبكة الأسلاك. إنغورجد، ثم يتم جمع القراد منفصلة من الماء تحتها. ومع ذلك، يؤدي هذا الأسلوب في تعريض القراد تغذية للمياه الملوثة بالبول والبراز التي يمكن أن تزيد من النمو الفطري والوفيات القراد 9 . وبالإضافة إلى ذلك، فإنه يزيد من إمكانية القراد الهروب من الحوض المائي، فضلا عن التسبب في الإجهاد على الفئران. للتحايل على هذه المشاكل، ونحن هنا تظهر القراد اليرقات التغذية على الفئران داخل البلاستيك صندوق الأحذية من نوع أقفاص القابل للتصرف. هذه الطريقة تسمح للسلوك الطبيعي من الفئران، ويزيد الانتعاش القراد إنغورجد، ويقلل من الوفيات القراد بسبب التلوث.
Protocol
Representative Results
Discussion
خطوات حاسمة في إطار بروتوكول
من المهم أن يكون لديك عدة مستويات من تدابير السلامة عند تربية القراد لتجنب هروب عرضي. استخدام شريط لاصق وخندق المياه حاسمة لضمان السلامة. فمن المهم للحفاظ على الماوس تخدير على وسادة التدفئة للحفاظ على ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.
Materials
| Puralube vet ointment | Amazon | Available from any Pet store or online store | |
| Disposable mouse cage | Innovive, San Diego, CA | MV 2 | Set of bottom and lid |
| White Alpha dri bedding | Lab Supply, Fort Worth, TX | ALPHA-Dri™ |
References
- Gleim, E. R., et al. Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA. Parasites & Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).
- Krober, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).
- Kuhnert, F. Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides. ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).
- Voigt, W. P., et al. In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium. Parasitol. 107, 257-263 (1993).
- Gregson, J. D., Smith, C. N. Ticks. Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).
- Sonenshine, D. E. . Biology of Ticks. 2, (1993).
- Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting. Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).
- Schumaker, T. S., Barros, D. M. Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory. J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).
- Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).
- James, A. M., Oliver, J. H. Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).
