Summary

칼리에서 패치 클램프 커패시턴스 레코딩을위한 방법

Published: July 29, 2007
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Abstract

우리는 헬드, 포유류의 중추 신경의 신경 단말기의 꽃받침에 presynaptic 패치 클램프 녹음을위한 기본 기술을 보여줍니다. presynaptic 터미널에서 전기 녹음 작업 잠재력, 칼슘 채널 전류, 소포의 융합 (exocytosis)와 후속 막 이해 (endocytosis)의 측정을 수 있습니다. 신경 전달 물질을 포함한 vesicles의 융합이 꽃받침의 세포막에 추가하는 소포 막 발생합니다. 세포막의 금액이 증가 커패시턴스의 증가로 측정됩니다. 커패시턴스의 후속 감소 endocytosis, 멤브레인 이해 또는 꽃받침 막에서 제거하는 과정을 나타냅니다. Endocytosis은 꽃받침의 구조를 유지하기 위해 필요하고 또한 앞으로 exocytosis 이벤트에 대한 신경 전달 물질로 가득합니다 vesicles를 형성하는 것이 필요합니다. 개최의 꽃받침에 커패시턴스 레코딩은 가능한 직접 빠르게 소낭성의 릴리스와 포유 동물 CNS 신경 터미널에서 후속 endocytosis을 측정하기 위하여 만들었습니다. 또한, 해당 postsynaptic 활동이 동시에 결합하여 레코딩을 사용하여 측정할 수 있습니다. 따라서 중추 신경계의 버렸네에서 presynaptic 및 postsynaptic 전기 활동의 완전한 그림이 준비를 사용하여 달성됩니다. 여기, 슬라이스 준비, 개최, 기본 패치 클램핑 기술 꽃받침의 복수의 식별 형태학의 기능 및 exocytosis와 endocytosis를 측정 커패시턴스 레코딩의 예제에 대한 방법은 제공됩니다.

Protocol

패치 클램프 설정 : 광학 : 좋은 세포를 찾으려면, 그리고 그것의 지위를 확립하기 위해 광학은 매우 중요합니다. 날카로운 모서리, 소프트 보이는 세포 : 세포의 명확한 이미지를보십시오. 첨부 꽃받침 잘 MNTB 교장 세포 찾기 위해 전체 필드를 검사합니다. 다른 각도에서 꽃받침의 복수를 찾는 요리를 회전합니다. 처음에…

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Cite This Article
Paradiso, K., Wu, W., Wu, L. Methods for Patch Clamp Capacitance Recordings from the Calyx. J. Vis. Exp. (6), e244, doi:10.3791/244 (2007).

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