Méthodes pour les enregistrements patch clamp Capacité du calice
Summary
Abstract
Nous démontrons les techniques de base pour l'enregistrement de patch-clamp présynaptique au calice de Held, un terminal de mammifères nerveuses du système nerveux central. Enregistrements électrique de la borne présynaptique permettent la mesure des potentiels d'action, les courants des canaux calciques, la fusion des vésicules (exocytose) et l'absorption de la membrane ultérieures (endocytose). La fusion des vésicules contenant des neurotransmetteurs entraîne la membrane de la vésicule d'être ajouté à la membrane cellulaire du calice. Cette augmentation de la quantité de membrane cellulaire est mesurée par une augmentation de la capacité. La réduction subséquente de la capacité d'endocytose indique, le processus d'absorption de la membrane ou le retrait de la membrane du calice. Endocytose, est nécessaire pour maintenir la structure du calice et il est également nécessaire de former des vésicules qui sera rempli avec les neurotransmetteurs pour les événements futurs exocytose. Capacité d'enregistrements au calice de Held ont permis de mesurer directement et rapidement la libération vésiculaire et l'endocytose ultérieure dans un terminal nerveuses du système nerveux central des mammifères. En outre, l'activité correspondante postsynaptique peut être mesurée simultanément en utilisant des enregistrements appariés. Ainsi, une image complète de l'activité présynaptique et postsynaptique électrique à une synapse du système nerveux central est réalisable à l'aide de cette préparation. Ici, les méthodes pour la préparation de tranche, les caractéristiques morphologiques pour l'identification des calices de Held, les techniques de patch base de serrage, et des exemples d'enregistrements capacité à mesurer l'exocytose et l'endocytose sont présentés.
