Metodi per la registrazioni Morsetto capacità patch dal Calyx
Summary
Abstract
Dimostriamo le tecniche di base per la registrazione presinaptico patch clamp al calice di Held, un mammifero terminali nervosi del sistema nervoso centrale. Registrazioni elettrico dal terminale presinaptico consentire la misurazione dei potenziali d'azione, correnti dei canali del calcio, fusione delle vescicole (esocitosi) e l'assorbimento della membrana successivi (endocitosi). La fusione di vescicole contenenti neurotrasmettitori provoca la membrana delle vescicole da aggiungere alla membrana cellulare del calice. Questo aumento della quantità di membrana cellulare è misurato come un aumento della capacità. La conseguente riduzione di capacità indica endocitosi, il processo di assorbimento della membrana o la rimozione dalla membrana calice. Endocitosi, è necessario mantenere la struttura del calice ed è anche necessario formare vescicole che verrà riempito di neurotrasmettitore per esocitosi eventi futuri. Registrazioni capacità al calice di Held hanno permesso di misurare direttamente e rapidamente rilascio vescicolare e endocitosi successivo in un nervo terminale nervoso centrale dei mammiferi. Inoltre, la corrispondente attività postsinaptica possono essere contemporaneamente misurata utilizzando le registrazioni appaiati. Così un quadro completo dell'attività presinaptica e postsinaptica elettrica presso una sinapsi del sistema nervoso centrale è realizzabile utilizzando questa preparazione. Qui, i metodi di preparazione fetta, caratteristiche morfologiche per l'identificazione dei calici di Held, tecniche di patch di base di fissaggio, ed esempi di registrazioni capacità di misurare esocitosi e endocitosi sono presentati.
