许多感染引起强烈的CTL反应,但偶尔,响应细胞的数量不关联控制病原体<sup> 1</sup>。 CTL的质量的措施之一是他们杀了专门的能力<sup> 2</sup>。 CFSE标签的靶细胞,可用于研究这种CTL反应质量<em>在体内</em<sup> 3,4</sup>。
羧基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)可用于轻松快捷地标签为利息细胞在体内的调查人口。这种标签经典被用来研究细胞增殖和迁移。在这里介绍的方法,我们已经缩短继转移,寻找生存和杀害的抗原表位的具体CFSE标记的靶细胞4-6后的时间表。一个CD8 + T细胞克隆特异性杀伤水平可以表明质量的响应,其数量可能会误导。特异性CD8 + T细胞可以成为与细胞因子的产生和杀害7,8下降随时间的功能用尽。此外,某些CD8 + T细胞克隆可能不杀以及其他不同的TCR特异性9。有效的细胞免疫(CMI)的,必须确定抗原产生的反应性T细胞不仅数量充足,而且功能强大的反应性T细胞。在这里,我们评估的两个肽特异性T细胞克隆BALB / c小鼠的特异性杀伤细胞%。
此法可修改进行调查,包括克隆扩增细胞的增殖能力,因为CFSE划分较为平等的后代 10,11 。它也可以使用CFSE标签探讨细胞迁移6,12的,虽然也有其他细胞的跟踪方法,可能更合适,这取决于你的假设,例如四聚体和生物发光13,这也可能与CFSE标签相结合,。
它重要的是要注意入流式细胞仪上的多渠道,CFSE出血,所以如果你想表面标记染色,PeCy7将是一?…
The authors have nothing to disclose.
我想感谢我介绍了免疫分析和鼠标处理比安卡Mothé,Oseroff卡拉和玛丽 – 法国DelGuercio。在GA的分配器实验室工作的经费由美国国立卫生研究院授予1 RO1 – AI – 073558,GLRCE授予1 – U54 – AI – 057153和Bard美3829 – 06。