Anopheles stephensi комары являются переносчиками малярии населяющие Индию и по всей Азии. Это видео демонстрирует технику для выполнения микроинъекций этого вида с трансгенов которые придают устойчивость к малярии комаров. Большая часть методологии продемонстрировали в этом видео применима к микроинъекции методов других видов комаров.
Abstract
Введение экзогенных генов в геноме комаров требует микроинъекции методов с учетом конкретных видов, представляющих интерес. Это видео демонстрирует протокол метод, используемый Джеймсом лаборатории microinject конструкций ДНК в эмбрионы Anopheles stephensi для генерации трансформированных комаров. Методы подготовки микроинъекции иглы, сбора и подготовки эмбрионов и выполнения микроинъекции проиллюстрированы.
Protocol
Подготовка заранее микроинъекции: Кровь комаров кормить: для инъекций с понедельника по среду кормить самок на предыдущую пятницу. Чтобы придать четверг и пятницу, кормить самок на понедельник на той же неделе. Подготовка Кварцевые иглы с помощью программы 2 и изотони…
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Injection Quartz needles
Sutter Instrument
O.D.- 1.0 mm, I.D.-0.70, 10 cm length, are prepared by drawing capillary tubing into a fine 3-8 um with a shaft of approximately 100-300 mm micropipette puller.
Terenius, O., Juhn, J., James, A. A. Injection of An. stephensi Embryos to Generate Malaria-resistant Mosquitoes. J. Vis. Exp. (5), e216, doi:10.3791/216 (2007).