Микрожидкостных устройств perifusion островок был разработан для оценки динамических секреции инсулина несколько островков и одновременное флуоресценции притока кальция и митохондриальной возможных изменений.
Abstract
Микрожидкостных устройств perifusion островок был разработан для оценки динамических секреции инсулина несколько островков и одновременное флуоресценции притока кальция и митохондриальной возможных изменений. Устройство состоит из трех слоев: первый слой содержит массив микромасштабной скважин (500 мкм и диаметром 150 мкм глубина), которые помогают обездвижить островков в то время как воздействию потока и максимально открытой площади островков, второй слой содержит круговой perifusion камеры (3 мм в глубину, 7 мм в диаметре), а третий слой содержит приточно-смешивание канала, который поклонники до введения в perifusion камеры (2 мм в ширину, 19 мм в длину и 500 мкм в высоту) для оптимизации эффективность перемешивания перед входом perifusion камеры. Создание различных градиентов глюкозы в том числе линейных, форму колокола, и квадратные формы также могут быть созданы в микрожидкостных сети perifusion и продемонстрировал.
Protocol
А. микротехнологий из 3-х слойные устройство perifusion микрожидкостных Нижняя Ну Мастер протокола (150 мкм глубоких скважин) Чистая пластины использованием лезвие в случае необходимости. Очистите ацетон, метанол, и МПА. Выполните плазменной обработки на 50 Вт в течение 30 с?…
Discussion
Традиционные островок perifusion систем (макроуровне и микромасштабной) имеют некоторые ограничения в том числе сложные настройки и дизайн, высокие технические требования, а также трудности для создания пользовательских предписано химические градиенты в системе. Микрожидкостных системы…
Acknowledgements
Эта работа была поддержана AAUW международной стипендии Adeola Adewola, NIH / NCRR (U42RR023245) Хосе Оберхольцером, и проект Чикаго диабета.
Adewola, A. F., Wang, Y., Harvat, T., Eddington, D. T., Lee, D., Oberholzer, J. A Multi-Parametric Islet Perifusion System within a Microfluidic Perifusion Device. J. Vis. Exp. (35), e1649, doi:10.3791/1649 (2010).