为了使慢病毒,DNA载体转染到人293细胞。收获后,集中上清液,荧光表达,流式细胞仪,是由病毒滴度。
RNA干扰(RNAi)是在活细胞中的基因沉默系统。 RNA干扰,基因同源序列短干扰RNA(siRNA)的沉默转录后的状态。短发夹RNA的siRNA的前体,可使用慢病毒,允许在多种细胞类型中的RNAi表达。慢病毒,如人类免疫缺陷病毒,能够感染分裂和非分裂细胞。我们将描述一个程序包慢病毒。包装是指主管病毒DNA载体的准备。慢病毒载体的生产系统是基于一个“分裂”的制度,其中病毒的天然基因组已分割成单独的辅助质粒结构。这种不同的病毒分子分裂成4个独立的向量,减少不定的慢病毒基因组的重组创造了复制能力的病毒的风险。在这里,一个载体,利息和3个包装载体的shRNA(P – VSVG,PRSV,pMDL)瞬时转染到人293细胞。至少48小时的潜伏期后,病毒上清收获和集中。最后,记者(荧光灯)的表达,流式细胞仪,是由病毒滴度。
桑德勒哮喘基本法研究中心(SABRE) 桑德勒基金会