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Chapters
- 00:00Title
- 02:56Plating of Cells and Treatment with BMP
- 04:12Fixation and Permeabilization
- 05:26Blocking and Primary Antibodies Application
- 06:49The Proximity Ligation Assay (PLA)
- 09:54Preparation for Imaging
- 10:56In Situ Proximity Ligation Assay Results from Neuro2a Cells Treated with BMP4
- 12:18Conclusion
Aquí se muestra cómo utilizar la ligadura de ensayo de proximidad (PLA), con una combinación de anticuerpos para visualizar la proteína morfogenética ósea (BMP) de señalización en células fijadas. Esta técnica nos permitió seguir la acumulación nuclear de endógeno BMP activa de efectos complejos y cuantificar sus niveles en el tiempo en BMP4 estimulación.
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DetectionSignaling Effector-complexesBMP4In Situ PLAProximity Ligation AssayBMP ReceptorsSmad1/5/8 EffectorsSmad4NucleusTranscription FactorsTraditional Immuno-fluorescence TechniquesPhospho-Smad PeptidesSensitivityHigh BackgroundGross QuantificationAntibody SignalIntensityPhotosensitive FluorescentProtein InteractionsSpecificityAmplification Of DNA SurrogateLocalized SignalSpotsRecognition EventMeasurement
