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Chapters
- 00:00Title
- 02:56Plating of Cells and Treatment with BMP
- 04:12Fixation and Permeabilization
- 05:26Blocking and Primary Antibodies Application
- 06:49The Proximity Ligation Assay (PLA)
- 09:54Preparation for Imaging
- 10:56In Situ Proximity Ligation Assay Results from Neuro2a Cells Treated with BMP4
- 12:18Conclusion
Qui si mostrano come utilizzare Ligation analisi di prossimità (PLA), con una combinazione di anticorpi per visualizzare proteina morfogenetica dell'osso (BMP) di segnalazione nelle cellule fisso. Questa tecnica ci ha permesso di seguire l'accumulo nucleare di BMP endogene attivate effettore complessi e quantificare i loro livelli nel corso del tempo sotto BMP4 stimolazione.
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DetectionSignaling Effector-complexesBMP4In Situ PLAProximity Ligation AssayBMP ReceptorsSmad1/5/8 EffectorsSmad4NucleusTranscription FactorsTraditional Immuno-fluorescence TechniquesPhospho-Smad PeptidesSensitivityHigh BackgroundGross QuantificationAntibody SignalIntensityPhotosensitive FluorescentProtein InteractionsSpecificityAmplification Of DNA SurrogateLocalized SignalSpotsRecognition EventMeasurement
