Настоящий протокол описывает высокочастотное ультразвуковое исследование для визуализации всей щитовидной железы мыши и мониторинга роста анапластической карциномы щитовидной железы.
Анапластическая карцинома щитовидной железы (АТХ) связана с плохим прогнозом и коротким средним временем выживания, но никакое эффективное лечение не улучшает результаты значительно. Генетически модифицированные мышиные модели, которые имитируют прогрессирование ATC, могут помочь исследователям изучить методы лечения этого заболевания. Скрещивание трех разных генотипов мышей: TPO-cre/ERT2; БрафCA/вес; Разработана трансгенная модель АТХ Trp53 Δex2-10/Δex2-10. Мышиная модель ATC была индуцирована внутрибрюшинной инъекцией тамоксифена с гиперэкспрессией BrafV600E и делецией Trp53, и опухоли генерировались в течение примерно 1 месяца. Ультразвук высокого разрешения применялся для исследования инициации и прогрессирования опухоли, а динамическая кривая роста была получена путем измерения размеров опухоли. По сравнению с магнитно-резонансной томографией (МРТ) и компьютерной томографией, ультразвук имеет преимущества в наблюдении за мышиной моделью ATC, например, является неинвазивным, портативным, в режиме реального времени и без радиационного облучения. Ультразвук высокого разрешения подходит для динамических и множественных измерений. Однако ультразвуковое исследование щитовидной железы у мышей требует соответствующих анатомических знаний и опыта. В этой статье представлена подробная процедура использования ультразвука высокого разрешения для сканирования опухолей в трансгенной модели ATC. Между тем, перечислены ультразвуковая регулировка параметров, навыки ультразвукового сканирования, анестезия и восстановление животных, а также другие элементы, требующие внимания во время процесса.
Хотя анапластическая карцинома щитовидной железы (АТХ) составляет менее 2% случаев рака щитовидной железы, она ежегодно вызывает более 50% смертей, связанных с раком щитовидной железы. Среднее время выживания после постановки диагноза с помощью АТХ составляет всего около 6 месяцев, и нет доступных методов лечения, которые значительно улучшают выживаемость 1,2.
Редкость УВД препятствует исследованиям, изучающим, как болезнь начинается и агрессивно прогрессирует. Недавно стали доступны генетически модифицированные модели мышей, имитирующие болезнь, которые дают представление о болезни и ее реакции на возможные методы лечения 3,4,5. Такие исследования требуют точной визуализации опухоли для измерений и мониторинга, которая обычно выполняется с использованием магнитно-резонансной томографии, компьютерной томографии или ультразвукового исследования высокого разрешения 6,7. Ультразвуковое исследование широко используется в органах мыши. Он имеет преимущества перед магнитно-резонансной томографией и компьютерной томографией, поскольку его можно выполнять в режиме реального времени и он не подвергает испытуемого облучению, а необходимое оборудование достаточно мало, чтобы быть портативным 8,9. Однако исследования по постоянному мониторингу роста УВД с помощью ультразвука встречаются редко; Таким образом, в этой работе исследуется полезность ультразвука в этом контексте.
Здесь представлен протокол использования ультразвука высокого разрешения для точного сканирования, мониторинга и измерения опухолей в мышиной модели ATC.
Этот протокол использует ультразвуковое исследование высокого разрешения для анализа ортотопических опухолей ATC в генно-инженерной мышиной модели. Трансгенная модель с генотипом TPO-cre/ERT2; БрафCA/вес; Trp53 Δex2-10/Δex2-10 был разработан в нашей лаборатории. Животные чрезме?…
The authors have nothing to disclose.
Это исследование не получило специального гранта от государственных, коммерческих или некоммерческих финансирующих агентств.
Adhesive tape | Winner | ||
Anesthesia system | RWDlifescience | ||
Brafflox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Chamber for anesthesia induction | RWDlifescience | ||
Cotton swabs | Winner | ||
Depilatory cream | Veet | ||
Electric heating blanket | Petbee | ||
Isoflurane vaporizer | RWDlifescience | ||
Medical gloves | Winner | ||
Paper towels | Breeze | B914JY | |
TPO-cre/ERT2 mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Trp53flox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Ultrasound gel | Keppler | KL-250 | |
Ultrasound machine | VisualSonics | Vevo 3100 |