Le présent protocole décrit l’échographie à haute fréquence pour visualiser l’ensemble de la glande thyroïde de la souris et surveiller la croissance du carcinome anaplasique de la thyroïde.
Le carcinome anaplasique de la thyroïde (ATC) est associé à un mauvais pronostic et à une courte durée médiane de survie, mais aucun traitement efficace n’améliore significativement les résultats. Les modèles murins génétiquement modifiés qui imitent la progression de l’ATC peuvent aider les chercheurs à étudier les traitements pour cette maladie. Croisement de trois génotypes différents de souris, un TPO-cre/ERT2; BrafCA/poids; Le modèle ATC transgénique Trp53 Δex2-10/Δex2-10 a été développé. Le modèle murin ATC a été induit par une injection intrapéritonéale de tamoxifène avec surexpression de BrafV600E et délétion de Trp53, et les tumeurs ont été générées en environ 1 mois. Une échographie à haute résolution a été appliquée pour étudier l’initiation et la progression de la tumeur, et la courbe de croissance dynamique a été obtenue en mesurant la taille des tumeurs. Par rapport à l’imagerie par résonance magnétique (IRM) et à la tomodensitométrie, l’échographie présente des avantages dans l’observation du modèle murin ATC, comme être non invasive, portable, en temps réel et sans exposition aux rayonnements. Les ultrasons haute résolution conviennent aux mesures dynamiques et multiples. Cependant, l’examen échographique de la thyroïde chez la souris nécessite des connaissances anatomiques et une expérience pertinentes. Cet article fournit une procédure détaillée pour l’utilisation d’ultrasons à haute résolution pour scanner les tumeurs dans le modèle ATC transgénique. Pendant ce temps, l’ajustement des paramètres ultrasoniques, les compétences en échographie, l’anesthésie et la récupération des animaux, et d’autres éléments qui nécessitent une attention pendant le processus sont énumérés.
Bien que le carcinome anaplasique de la thyroïde (ATC) représente moins de 2 % des cancers de la thyroïde, il cause plus de 50 % des décès liés au cancer de la thyroïde chaque année. Le temps de survie médian après le diagnostic d’ATC n’est que d’environ 6 mois, et aucun traitement n’est disponible qui améliore significativement la survie 1,2.
La rareté de l’ATC a entravé la recherche sur la façon dont la maladie commence et progresse agressivement. Des modèles murins génétiquement modifiés qui imitent la maladie sont récemment devenus disponibles, qui fournissent des informations sur la maladie et ses réponses aux traitements possibles 3,4,5. De telles études nécessitent une imagerie tumorale précise pour les mesures et la surveillance, qui est généralement effectuée à l’aide de l’imagerie par résonance magnétique, de la tomodensitométrie ou de l’échographie à haute résolution 6,7. L’échographie a été largement utilisée dans les organes de souris. Il présente des avantages par rapport à l’imagerie par résonance magnétique et à la tomodensitométrie, car il peut être effectué en temps réel et n’expose pas le sujet à un rayonnement, et l’équipement nécessaire est suffisamment petit pour être portable 8,9. Cependant, les études sur la surveillance continue de la croissance de l’ATC à l’aide d’ultrasons sont rares; Par conséquent, ce travail explore l’utilité de l’échographie dans ce contexte.
Ici, un protocole d’utilisation de l’échographie à haute résolution pour scanner, surveiller et mesurer avec précision les tumeurs dans un modèle murin d’ATC est présenté.
Ce protocole utilise l’échographie à haute résolution pour analyser les tumeurs ATC orthotopiques dans un modèle murin génétiquement modifié. Le modèle transgénique, avec un génotype de TPO-cre/ERT2 ; BrafCA/poids; Trp53 Δex2-10/Δex2-10, a été développé dans notre laboratoire. Les animaux surexpriment BrafV600E et manquent de Trp53; L’injection intrapéritonéale de tamoxifène chez les animaux entraîne une croissance tumorale après environ 1 mois<s…
The authors have nothing to disclose.
Cette recherche n’a reçu aucune subvention spécifique d’organismes de financement publics, commerciaux ou sans but lucratif.
Adhesive tape | Winner | ||
Anesthesia system | RWDlifescience | ||
Brafflox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Chamber for anesthesia induction | RWDlifescience | ||
Cotton swabs | Winner | ||
Depilatory cream | Veet | ||
Electric heating blanket | Petbee | ||
Isoflurane vaporizer | RWDlifescience | ||
Medical gloves | Winner | ||
Paper towels | Breeze | B914JY | |
TPO-cre/ERT2 mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Trp53flox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Ultrasound gel | Keppler | KL-250 | |
Ultrasound machine | VisualSonics | Vevo 3100 |