הפרוטוקול הנוכחי מתאר אולטרה-סאונד בתדירות גבוהה להדמיית בלוטת התריס כולה של העכבר ולמעקב אחר צמיחת קרצינומה אנפלסטית של בלוטת התריס.
קרצינומה אנפלסטית של בלוטת התריס (ATC) קשורה לפרוגנוזה גרועה ולזמן הישרדות חציוני קצר, אך אין טיפול יעיל שמשפר את התוצאות באופן משמעותי. מודלים מהונדסים גנטית המחקים את התקדמות ATC עשויים לסייע לחוקרים לחקור טיפולים למחלה זו. חציית שלושה גנוטיפים שונים של עכברים, TPO-cre/ERT2; BrafCA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10 מודל ATC מהונדס פותח. מודל ATC murine נגרם על ידי הזרקה intraperitoneal של טמוקסיפן עם ביטוי יתר של BrafV600E ומחיקה של Trp53, והגידולים נוצרו בתוך כחודש. אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה הופעל כדי לחקור את התחלת הגידול והתקדמותו, ועקומת הצמיחה הדינמית התקבלה על ידי מדידת גודל הגידול. בהשוואה לדימות תהודה מגנטית (MRI) וסריקת טומוגרפיה ממוחשבת, לאולטרסאונד יתרונות בצפייה במודל ATC murine, כגון היותו לא פולשני, נייד, בזמן אמת וללא חשיפה לקרינה. אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה מתאים למדידות דינמיות ומרובות. עם זאת, בדיקה אולטרה-סונוגרפית של בלוטת התריס בעכברים דורשת ידע וניסיון אנטומיים רלוונטיים. מאמר זה מספק הליך מפורט לשימוש באולטרסאונד ברזולוציה גבוהה לסריקת גידולים במודל ATC מהונדס. בינתיים, התאמת פרמטרים קוליים, מיומנויות סריקת אולטרסאונד, הרדמה והתאוששות של בעלי החיים, ואלמנטים אחרים הזקוקים לתשומת לב במהלך התהליך מפורטים.
למרות שקרצינומה אנפלסטית של בלוטת התריס (ATC) מהווה פחות מ -2% ממקרי סרטן בלוטת התריס, היא גורמת ליותר מ -50% ממקרי המוות הקשורים לסרטן בלוטת התריס מדי שנה. זמן ההישרדות החציוני לאחר האבחנה עם ATC הוא רק כ 6 חודשים, ואין טיפולים זמינים המשפרים באופן משמעותי את הישרדות 1,2.
הנדירות של ATC הקשתה על המחקר הבוחן כיצד המחלה מתחילה ומתקדמת באגרסיביות. לאחרונה התפרסמו מודלים של עכברים מהונדסים גנטית המחקים את המחלה, המספקים תובנות לגבי המחלה ותגובותיה לטיפולים אפשריים 3,4,5. מחקרים כאלה דורשים הדמיה מדויקת של הגידול לצורך מדידות וניטור, המבוצעת בדרך כלל באמצעות הדמיית תהודה מגנטית, טומוגרפיה ממוחשבת או אולטרה-סאונד ברזולוציה גבוהה 6,7. אולטרה-סאונד נמצא בשימוש נרחב באיברי עכבר. יש לו יתרונות על פני הדמיית תהודה מגנטית וטומוגרפיה ממוחשבת שכן ניתן לבצע אותו בזמן אמת ואינו חושף את הנושא לקרינה, והציוד הדרוש קטן מספיק כדי להיות נייד 8,9. עם זאת, מחקרים על ניטור רציף של צמיחת ATC באמצעות אולטרסאונד הם נדירים; לכן, עבודה זו בוחנת את התועלת של אולטרסאונד בהקשר זה.
כאן מוצג פרוטוקול לשימוש באולטרה-סאונד ברזולוציה גבוהה לסריקה, ניטור ומדידה מדויקים של גידולים במודל עכבר של ATC.
פרוטוקול זה משתמש באולטרה-סאונד ברזולוציה גבוהה כדי לנתח גידולי ATC אורתוטופיים במודל עכבר מהונדס גנטית. המודל המהונדס, עם גנוטיפ של TPO-cre/ERT2; BrafCA/wt; Trp53 Δex2-10/Δex2-10, פותח במעבדה שלנו. בעלי החיים מבטאים יתר על המידה BrafV600E וחסרים Trp53; הזרקת בעלי חיים intraperitoneally עם טמוקסיפ?…
The authors have nothing to disclose.
מחקר זה לא קיבל מענק ספציפי מסוכנויות מימון ציבוריות, מסחריות או שלא למטרות רווח.
Adhesive tape | Winner | ||
Anesthesia system | RWDlifescience | ||
Brafflox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Chamber for anesthesia induction | RWDlifescience | ||
Cotton swabs | Winner | ||
Depilatory cream | Veet | ||
Electric heating blanket | Petbee | ||
Isoflurane vaporizer | RWDlifescience | ||
Medical gloves | Winner | ||
Paper towels | Breeze | B914JY | |
TPO-cre/ERT2 mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Trp53flox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
Ultrasound gel | Keppler | KL-250 | |
Ultrasound machine | VisualSonics | Vevo 3100 |