يصف البروتوكول الحالي نموذجا للفأر لاستئصال التعصيب الأدرينالي من خلال تحديد واستئصال العقدة العنقية العلوية.
تشير الأدلة المتزايدة إلى أن الجهاز العصبي السمبثاوي يلعب دورا مهما في تطور السرطان. ينظم التعصيب الأدرينالي إفراز الغدد اللعابية ، وإيقاع الساعة البيولوجية ، والضمور البقعي ، ووظيفة المناعة ، وفسيولوجيا القلب. استئصال الودي الجراحي للفئران هو طريقة لدراسة آثار التعصيب الأدرينالي من خلال السماح بالاستئصال الأدرينالي الكامل من جانب واحد مع تجنب الحاجة إلى التدخل الدوائي المتكرر والآثار الجانبية المرتبطة به. ومع ذلك ، فإن استئصال الودي الجراحي في الفئران يمثل تحديا تقنيا بسبب صغر حجم العقدة العنقية العلوية. تصف هذه الدراسة تقنية جراحية لتحديد واستئصال العقدة العنقية العلوية بشكل موثوق لاستئصال الجهاز العصبي الودي. يتم التحقق من صحة التعرف الناجح على العقدة وإزالتها عن طريق تصوير العقد الودية الفلورية باستخدام فأر معدل وراثيا ، وتحديد متلازمة هورنر بعد الاستئصال ، وتلطيخ العلامات الأدرينالية في العقد المقطوعة ، ومراقبة تناقص التألق المناعي الأدرينالي في الأعضاء المستهدفة بعد استئصال الودي. يتيح هذا النموذج إجراء دراسات مستقبلية لتطور السرطان بالإضافة إلى العمليات الفسيولوجية الأخرى التي ينظمها الجهاز العصبي الودي.
أفادت دراسات متعددة أن الأعصاب في البيئة المكروية للورم تلعب دورا نشطا في دعم تطور الورم. ثبت أن استئصال الأعصاب الأدرينالية الودية يضعف تطور الورم وانتشاره في سرطان البروستاتا والمعدة في الجسم الحي1،2،3 ، في حين أن الحصار الدوائي للمستقبلات الأدرينالية يمنع نمو الورم في سرطان الرأس والرقبة4. كما تم وصف المشاركة العصبية الودية في تطور سرطان البنكرياس وعنق الرحم والخلايا القاعدية5،6،7.
داخل الجهاز العصبي السمبثاوي، العقدة العنقية العلوية (SCG) هي العقدة الوحيدة في الجذع السمبثاوي التي تعصب الرأس. ينظم SCG الوظائف الفسيولوجية المختلفة ، مثل إفراز اللعاب وإيقاع الساعة البيولوجية ، ويعصب مباشرة الغدد الليمفاوية العنقية8،9،10. كما تورط SCG في العمليات المرضية مثل التنكس البقعي11 وتطور تسلخ الأبهر12. بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ عن استئصال SCG لتفاقم إصابة الكلى الحادة الناجمة عن نقص التروية13 وكذلك تغيير ميكروبات الأمعاء في الفئران14.
سيمثل الاستئصال الكامل ل SCG في نموذج الفأر تقنية تجريبية قيمة لتمكين أبحاث السرطان والجهاز العصبي اللاإرادي. في حين أن العديد من الدراسات قد استخدمت حصار مستقبلات الأدرينالية الدوائية كاستئصال الأدرينالية15،16،17،18،19،20 ، يسمح الاستئصال الجراحي بالاجتثاث الأدرينالية الكامل من جانب واحد مع تجنب الحاجة إلى التدخل الدوائي المتكرر والآثار الجانبية المرتبطةبه 21،22،23.
تم وصف الاستئصال الجراحي ل SCG في الفئران24 ، واستخدمت معظم التقارير التي تدرس تأثير استئصال العقدة العنقية العلوي (SCGx) نموذج الفئران. بالمقارنة مع نموذج الفئران ، فإن SCGx أكثر تحديا من الناحية الفنية في الفئران بسبب صغر حجم SCG. ومع ذلك ، فإن الفئران أسهل نسبيا في التعامل معها ، وأكثر فعالية من حيث التكلفة ، وأكثر قابلية للتلاعب الجيني. كان غارسيا وآخرون من أوائل الذين أبلغوا عن SCGx في الفئران ، ووجد أنه يؤثر على إطلاق الأنسولين25. في الآونة الأخيرة ، وصف Ziegler et al. SCGx في الفئران بناء على التقنية المنشورة الموصوفة للفئران24،26. تصف هذه المقالة وغيرها طريقة يتم فيها تحديد الشريان السباتي المشترك (CCA) وتشريحه لأول مرة ، ويتم إزالة SCG لاحقا من تشعب CCA21،22،27،28. في هذه المقالة ، يتم وصف تقنية أقل توغلا وأكثر أمانا في الفئران التي تتجنب تشريح CCA ، وبالتالي تقليل المضاعفات الأكثر خطورة لهذا الإجراء – النزيف من إصابة في CCA.
يصف هذا البروتوكول نموذج الماوس للاستئصال الجراحي من جانب واحد لمدخلات SCG. تسمح هذه التقنية بدراسة آثار التعصيب الأدرينالي في بيئات مختلفة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أيضا زراعة العقدة المتعاطفة المقطوعة في ثقافة 3D matrigel للتجارب في المختبر 30.
تم إجراء الدراسا?…
The authors have nothing to disclose.
تم دعم Q. W. من قبل المعاهد الوطنية للصحة T32CA009685. تم دعم RJ W. من قبل المعاهد الوطنية للصحة R01CA219534. تم دعم المرافق الأساسية لمركز ميموريال سلون كيترينج للسرطان من قبل المعاهد الوطنية للصحة P30CA008748.
Anti-Tyrosine Hydroxylase Antibody | EMD Millipore | AB152 | |
Artificial Tears Lubricant Ophthalmic Ointment | Akorn | 59399-162-35 | |
Curity 2 x 2 Inch Gauze Sponge 8 Ply, Sterile | Covidien | 1806 | |
Derf Needle Holder | Thomas Scientific | 1177K00 | |
Dissecting Microscope | |||
Dumont #5/45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
Dumont #7b Forceps | Fine Science Tools | 11270-20 | |
ETHILON Nylon Suture | Ethicon | 698H | |
Fine Scissors – ToughCut | Fine Science Tools | 14058-09 | |
Hypoallergenic Surgical Tape | 3M Blenderm | 70200419342 | |
Induction Chamber, 2 Liter | VetEquip | 941444 | |
Isoflurane | Baxter | 1001936060 | |
Nair | Church & Dwight Co., Inc | 40002957 | chemical hair removing agent |
NORADRENALINE RESEARCH ELISA | Labor Diagnostika Nord (Rocky Mountain Diagnostics) | BA E-5200 | |
NSG Mouse | Jackson Laboratory | JAX:005557 | |
Povidone-Iodine Swabstick | PDI | S41350 | |
Webcol Alcohol Preps | Covidien | 5110 |