臨床文脈では、局所性膵臓癌の患者は汎膵切除術を受け、続いてアジュバント治療を受ける。ここで報告されるこのプロトコルは、膵臓癌の正体性移植を経て、遠位汎化切欠切術および脾臓摘出術を通じて、ヌードマウスでこの臨床シナリオをモデル化する安全で効果的な方法を確立することを目的としている。
膵臓癌(PC)の手術を検討されている患者のアジュバントおよび/またはネオアジュバント療法を研究するための満足のいく動物モデルの欠如がある。この不全に対処するために、PCの異形移植を伴うマウスモデルを記述し、続いて遠位汎化切欠切および脾臓摘出術を行う。このモデルは、アジュバントおよびネオアジュバントの設定における様々な治療アプローチの研究に対して、安全かつ適切に柔軟であることが実証されています。
このモデルでは、膵臓腫瘍は、まず、ヒト膵臓癌細胞(ルシファーサタグ付きAsPC-1)とヒト癌関連膵星形細胞をBalb/cアチミックヌードマウスの遠位膵臓に移植することによって生成される。3週間後、癌は再ラパロトミー、遠位汎腎切除術および脾臓摘出術によって切除される。このモデルでは、生物発光イメージングを使用して、がんの発症の進行と切除/治療の効果に従うことができます。切除後、アジュバント療法を行うことができる。あるいは、切除前にネオアジュバント治療を施すことができる。
45匹のマウスからの代表的なデータが提示される。すべてのマウスは、止まり止めの問題のない遠位汎化切欠切術/脾臓摘出術に成功した。5mmを超える巨視近位膵臓マージンは43(96%)で達成されたマウス。膵切除の技術的成功率は100%で、早期死亡率と罹患率は0%であった。切除後の週に動物は誰も死ななかった。
要約すると、臨床シナリオを模倣したマウスにおける膵臓癌の外科的切除モデルに対する堅牢で再現可能な技術について述べた。このモデルは、アジュバントおよびネオアジュバントの両方の治療のテストに有用である可能性があります。
膵管腺癌(膵癌[PC])は予後不良1と関連している。外科的切除は、PCの唯一の潜在的治癒的治療であり、早期疾患を呈する患者に対して考慮されるべきである。残念なことに、R0切除術(すなわち、腫瘍のない切除マージン)を有しても、再発率(局所または未検出の転移性疾患から)は2、3である。したがって、全身アジュバント療法は、切除4を受けるほぼすべての患者に示される。さらに、ネオアジュバント療法は現在、境界分化可能な癌に対してのみ推奨されているが、その徴候は、その日常的な使用が多くの臨床研究5、6、7、8の焦点となるほど拡大している。切除を伴うPCの新しい治療アプローチを開発するためには、これらのアプローチは、臨床現場を正確に再現する前臨床モデルで最初に評価される必要があります。
PCの異所性マウスモデルは、薬物治療9、10をテストするために過去に頻繁に使用されてきた。これらの多くは、マウス膵臓に癌細胞を単独で注入することによって産生され、PCの特徴である顕著な間質を欠いた腫瘍をもたらした。さらに最近では、ヒトPCとヒト膵星細胞(PSC、PC中のコラーゲン質素の主要な生産者)の混合物を注入して最初に開発したもののような共噴射装具モデルが、11,12で定期的に使用されるようになってきた。癌と間質細胞の併用による腫瘍は、(i)PCの癌元素と特徴的な間質(デスモプラスチック)成分の両方を示し、かつ(ii)癌細胞増殖および転移を増強した。したがって、このモデルは人間のPCによく似ています。多くの整形体PCの切除モデルは13、14、15、16と記載されているが、このモデルほど正確なヒトにおける膵切除の臨床的実態を反映するものは一切ないので、アジュバントまたはネオアジュバント治療の検査に最適ではない。
提示されたマウスモデルの目的は、(i)不注意な腹膜播種を最小限に抑えながら、正腸膵臓癌を移植することに成功し、(ii)その後癌を完全に切断する方法を実証することであった。この論文は、この技術のヒントと潜在的な落とし穴を強調しています。
膵臓癌の切除整形マウスモデルは、アジュバントおよびネオアジュバント治療の検査を可能にするため重要である。これは、手術が最も効果的な治療であり続けるが、再発のリスクが高いと関連している膵臓癌において特に重要である。本論文では、切除術で治癒可能な膵臓癌を確実に産生する方法について述べ、ネオアジュバント/アジュバント療法が必要な臨床シナリオを複製する。
<…The authors have nothing to disclose.
著者は、アヴナー膵臓癌財団からの支援を受けています。
Animals, Materials and Equipment for Implantation Procedure | |||
AsPC-1 human pancreatic cancer cell line, luciferase tagged (luc+ gene from Promega PGL3 Basic plasmid) | American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA | supplied by Professor Takashi Murakami, Saitama Medical University, Saitama, Japan | |
Autoclip wound clips, 9 mm | Becton Dickson Pty Ltd, North Ryde, NSW, Australia | 500346 | |
Basic Dressing Pack | Multigate Medical Products Pty Ltd, Villawood, NSW, Australia | ||
Cancer associated human pancreatic stellate cells | Pancreatic Research Group cell bank | In house cell bank | |
Cryogenic tubes, 1.0 mL | Thermo Fisher Scientific Australia Pty Ltd, Scoresby, VIC, Australia | 366656 | |
Disposable stainless-steel scalpel blade with handle, size 15 | Livingstone International, Mascot, NSW, | SCP15 | |
Foetal bovine serum (FBS) | Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia | 16000044 | |
Gilles fine tooth forceps 12 cm | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Heated mats to maintain body temperature during surgery and postoperative recovery | Generic | ||
Homozygous athymic nude mice: Strain BALB/c-Fox1nu/Ausb, female | Australian Bioresources, Moss Vale, NSW, Australia | ||
Iscove's modified Dulbecco's medium (IMDM) with 4mM L-glutamine and no phenol red | Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia | 21056023 | |
Jewellers forceps 11.5 cm | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Micro needle holder (round handle) 15 cm straight | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Micro scissors (round handle) 15 cm straight | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Penicillin 10,000 U/mL, streptomycin 10,000 μg/mL | Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia | 15140122 | |
Polyglycolic acid suture, size USP 5/0 on 13mm half-circle round-bodied needle | Braun Australia Pty Ltd, Bella Vista, NSW, Australia | C1049407 | |
Portable weighing scale | Precision balances, Bradford, MA, USA | ||
Reflex clip applier and clip remover | World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA | 500345 | |
Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 with phenol red and 300 mg/L Lglutamine | Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia | 11875085 | |
Round bodied vessel dilator 15 cm, 0.1 mm tip | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Trypsin 0.05%, EDTA 0.02% | Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia | 25300054 | For pancreatic stellate cells |
Trypsin 0.25%, EDTA 0.02% | Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia | 25200056 | For ASPC-1 cells |
U-100 insulin syringes, 0.5 mL with 29 G (0.33 mm) × 13 mm needle | Terumo Medical Corporation, Elkton, MD, USA | ||
Equipment for Resection Procedure | |||
Alm self-retaining retractor | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Autoclip wound clips 9 mm | Becton Dickson Pty Ltd, North Ryde, NSW | 500346 | |
Basic Dressing Pack | Multigate Medical Products Pty Ltd, Villawood, NSW, Australia | 08-559NP | |
Disposable stainless-steel scalpel blade with handle, size 15 | Livingstone International, Mascot, NSW, | SCP15 | |
Gilles fine tooth forceps 12 cm | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Hand-held high temperature fine tip cautery | Bovie Medical Corporation, Melville, NY, USA | AA01 | |
Heated mats to maintain body temperature during surgery and postoperative recovery | Generic | ||
IVIS Lumina II Bioluminescent Imaging Device | Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA, USA | ||
Jewellers forceps 11.5 cm | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Micro needle holder (round handle) 15 cm straight | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Micro scissors (round handle) 15 cm straight | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Polyglycolic acid suture, size USP 5/0 on 13mm half-circle round-bodied needle | Braun Australia Pty Ltd, Bella Vista, NSW, Australia | C1049407 | |
Portable weighing scale | Precision balances, Bradford, MA, USA | ||
Reflex wound clip applier and clip remover | World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA | 500345 | |
Round bodied vessel dilator 15 cm, 0.1 mm tip | Generic stainless steel microsurgical instrument set | ||
Titanium “Weck style” Ligaclip, small | HZMIM, Hangzhou, China | ||
Titanium Ligaclip applier for open surgery, small | HZMIM, Hangzhou, China | ||
Volatile anaesthetic machine, including vapouriser and induction chamber | Generic | Generic vapouriser and induction chamber | |
Drugs for Procedures | |||
70% w/w ethanol solution | Sigma-Aldrich Pty Ltd, Castle Hill, NSW, Australia | Applied topically as surgical skin preparation | |
Buprenorphine 0.3 mg/mL | Troy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, Australia | Dose: 0.05 mg/kg s.c. | |
D-Luciferin (1 U/g) | PerkinElmer, Inc., Waltham, MA, USA | 122799 | diluted in PBS to 15 mg/mL. Dose: 150 mg/kg i.p |
Enrofloxacin 50 mg/mL | Troy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, Australia | Dose: 5 mg/kg s.c. | |
Flunixin 50 mg/mL | Norbrook Laboratories Australia, Tullamarine, VIC, Australia | Dose: 2.5 mg/kg s.c. | |
Isoflurane | Zoetis Australia Pty Ltd., Rhodes, NSW, Australia | Dose (vapourised with oxygen): 4% induction, 3% maintenance | |
Ketamine 100 mg/mL | Maylab, Slacks Creek, QLD, Australia | Dose: 80 mg/kg i.p. | |
Povidone-Iodine 10% w/v solution | Perrigo Australia, Balcatta, WA, Australia | RIO00802F | Applied topically to the anterior abdomen as surgical skin preparation |
Refresh eye ointment (liquid paraffin 42.5% w/w, soft white paraffin 57.3% w/w) | Allergan Australia Pty Ltd, Gordon, NSW, Australia | Applied to both eyes | |
Sodium chloride 0.9% w/v | Braun Australia Pty Ltd, Bella Vista, NSW, Australia | 9481P | Dose: 900 μL s.c. |
Water for injections BP | Pfizer Australia, Sydney, NSW, Australia | For dilution of drugs | |
Xylazine 20 mg/mL | Troy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, Australia | Dose: 10 mg/kg i.p. |