Summary

15Azot Analizi için Mikroplot Tasarımı ve Bitki ve Toprak Numune Hazırlama

Published: May 10, 2020
doi:

Summary

15N izleyici araştırması için bir mikroplot tasarımı, mevsiminde birden fazla bitki ve toprak örnekleme olayını barındıracak şekilde tanımlanmıştır. Öğütme ve tartım protokolleri de dahil olmak üzere toprak ve bitki numune toplama ve işleme prosedürleri 15N analiz için konur.

Abstract

Introduction

Gübre azotu (N) kullanımı tarımda artan küresel nüfusun gıda, lif, yem ve yakıt taleplerini karşılamak için gereklidir, ancak tarım salkı larından kaynaklanan N kayıpları çevresel kaliteyi olumsuz etkileyebilir. N toprak-kırpma sisteminde birçok dönüşümler uğrar çünkü, N bisiklet daha iyi anlaşılması, ürün kullanımı, ve gübre N genel kaderi N kullanım verimliliğini teşvik ve çevresel kayıpları en aza indirmek yönetim uygulamalarını geliştirmek için gereklidir. Geleneksel N gübre çalışmaları öncelikle ürün verimi, uygulanan N oranına göre mahsul N alımı (görünür gübre kullanım verimliliği) ve artık toprak N gibi sezon sonu ölçümleri üzerinde bir tedavinin etkisi üzerinde duruluyor. Bu çalışmalar genel sistem N girdileri, çıktıları ve verimlilikleri ölçerken, gübre kaynaklarından veya topraktan elde edilen toprak mahsul sisteminde N’yi tanımlayamazlar ve ölçemezler. Toprak mahsul sisteminde n (FDN) elde edilen gübrenin akıbetini izlemek ve ölçmek için kararlı izotoplar kullanılarak farklı bir yaklaşım kullanılmalıdır.

Azot un doğada 14 N/ 15N için nispeten sabit bir oranda meydana gelen 14N/15N1 (konsantrasyon0,366 atom % 15N veya 3600 ppm 15N2,3)olmak üzere iki kararlı izotopvardır. 15 15N zenginleştirilmiş gübrenin eklenmesi toprak sisteminin toplam 15N içeriğini artırır. 15N zenginleştirilmiş gübre zenginleştirilmemiş toprak N ile karışımları gibi, 14N /15N oranı ölçülen değişiklik araştırmacılar toprak profilinde FDN izlemek ve ürüniçine 3,4sağlar. Bir kütle dengesi, sistemdeki toplam 15N izleyici miktarı ve 2′2nin her biri ölçülerek hesaplanabilir. 15N zenginleştirilmiş gübreler geleneksel gübrelere göre çok daha pahalı olduğundan, 15N zenginleştirilmiş mikroplotlar genellikle arıtma arazileri içinde gömülür. Bu yöntem ödevinin amacı, mısır için birden fazla mevsim içi toprak ve bitki örnekleme etkinlikleri(Zea mays L.) için mikroçizimler iman eden küçük bir arazi araştırma tasarımını tanımlamak ve toplam 15N analizi için bitki ve toprak örneklerinin hazırlanması için protokoller sunmaktır. Bu sonuçlar daha sonra N gübre kullanım verimliliğini tahmin etmek ve toplu toprak ve mahsul fdn için kısmi Bir N bütçe muhasebe oluşturmak için kullanılabilir.

Protocol

1. Alan site açıklaması NOT: 15N izleme alanı denemesi yaparken, seçilen siteler toprak, topografya ve fiziksel özellikler nedeniyle değişimi en aza indirmelidir5. Çapraz kontaminasyon eğim, rüzgar veya su translokasyonu veya toprak işlemesi nedeniyle yanal toprak hareketi sonrasında oluşabilir, toprak N dikey dağılımı yeraltı su akışı ve kiremitdrenajıtarafından etkilenebilir 6 . Geçmiş yönetimi (?…

Representative Results

Toplam (FDN + SDN) yerüstü biyokütle N ilk büyüme sezonunda her ardışık örnekleme olayı ile arttı(Şekil 4). Gübre kaynaklı N konsantrasyonu, v8’deki toplam yer üstü biyokütlesi N’nin ± 4 (ortalama ± standart hata) ile büyüme mevsiminde en yüksek seviyedeydi ve birbirini izleyen her örnekleme periyoduile birlikte azaldı(Şekil 4A).</s…

Discussion

Kararlı izotop araştırma toprak-kırpma sistemi üzerinden FDN izleme ve ölçmek için yararlı bir araçtır. Ancak, ihlal edilirse bu metodolojiyi kullanarak çıkarılan sonuçları geçersiz kılabileceği ne kadar önemli üç temel varsayım vardır. Onlar 1) tracer düzgün sistem boyunca dağıtılır, 2) çalışma kapsamında süreçler aynı oranlarda oluşur ve 3) N 15N zenginleştirilmiş havuz bırakarak3dönmez . Bu çalışma toprak-mahsul sistemi boyunca toplam FDN …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar Minnesota Mısır Araştırma ve Promosyon Konseyi, Hueg-Harrison Bursu ve Minnesota Discovery, Research and InnoVation Economy (MnDRIVE) Bursu’nun desteğini kabul eder.

Materials

20 mL scintillation vial ANY; Fisher Scientific is one example 0334172C
250 mL borosilicate glass bottle QORPAK 264047
48-well plate EA Consumables E2063
96-well plate EA Consumables E2079
Cloth parts bag (30×50 cm) ANY NA For corn ears
CO2 Backpack Sprayer ANY; Bellspray Inc is one example Model T
Coin envelop (6.4×10.8 cm) ANY; ULINE is one example S-6285 For 2-mm ground plant samples
Corn chipper ANY; DR Chipper Shredder is one example SKU:CS23030BMN0 For chipping corn biomass
Corn seed ANY NA Hybrid appropriate to the region
Disposable shoe cover ANY; Boardwalk is one example BWK00031L
Ethanol 200 Proof ANY; Decon Laboratories Inc. is one example 2701TP
Fabric bags with drawstring (90×60 cm) ANY NA For plant sample collection
Fertilizer Urea (46-0-0) ANY NA ~0.366 atom % 15N
Hand rake ANY; Fastenal Company is one example 5098-63-107
Hand sickle ANY; Home Depot is one example NJP150 For plant sample collection
Hand-held soil probe ANY; AMS is one example 401.01
Hydraulic soil probe ANY; Giddings is one example GSPS
Hydrochloric acid, 12N Ricca Chemical R37800001A
Jar mill ANY; Cole-Parmer is one example SI-04172-50
Laboratory Mill Perten 3610 For grinding grain
Microbalance accurate to four decimal places ANY; Mettler Toledo is one example XPR2
N95 Particulate Filtering Facepiece Respirator ANY, ULINE is one example S-9632
Neoprene or butyl rubber gloves ANY NA For working in HCl acid bath
Paper hardware bags (13.3×8.7×27.8 cm) ANY; ULINE is one example S-8530 For soil samples and corn grain
Plant grinder ANY; Thomas Wiley Model 4 Mill is one example 1188Y47-TS For grinding chipped corn biomass to 2-mm particles
Plastic tags ULINE S-5544Y-PW For labeling fabric bags and microplot stalk bundles
Sodium hydroxide pellets, ACS Spectrum Chemical SPCM-S1295-07
Soil grinder ANY; AGVISE stainless steel grinder with motor is one example NA For grinding soil to pass through a 2-mm sieve
Tin capsule 5×9 mm Costech Analytical Technologies Inc. 041061
Tin capsule 9×10 mm Costech Analytical Technologies Inc. 041073
Urea (46-0-0) MilliporeSigma 490970 10 atom % 15N

References

  1. Sharp, Z. . Principles of Stable Isotope Geochemistry. , (2017).
  2. Van Cleemput, O., Zapata, F., Vanlauwe, B. Guidelines on Nitrogen Management in Agricultural Systems. Guidelines on Nitrogen Management in Agricultural Systems. 29 (29), 19 (2008).
  3. Hauck, R. D., Meisinger, J. J., Mulvaney, R. L. Practical considerations in the use of nitrogen tracers in agricultural and environmental research. Methods of Soil Analysis: Part 2-Microbiological and Biochemical Properties. , 907-950 (1994).
  4. Bedard-Haughn, A., Van Groenigen, J. W., Van Kessel, C. Tracing 15N through landscapes: Potential uses and precautions. Journal of Hydrology. 272 (1-4), 175-190 (2003).
  5. Peterson, R. G. . Agricultural Field Experiments: Design and Analysis. , (1994).
  6. Follett, R. F. Innovative 15N microplot research techniques to study nitrogen use efficiency under different ecosystems. Communications in Soil Science and Plant Analysis. 32 (7/8), 951-979 (2001).
  7. Russelle, M. P., Deibert, E. J., Hauck, R. D., Stevanovic, M., Olson, R. A. Effects of water and nitrogen management on yield and 15N-depleted fertilizer use efficiency of irrigated corn. Soil Science Society of America Journal. 45 (3), 553-558 (1981).
  8. Schindler, F. V., Knighton, R. E. Fate of Fertilizer Nitrogen Applied to Corn as Estimated by the Isotopic and Difference Methods. Soil Science Society of America Journal. 63, 1734 (1999).
  9. Stevens, W. B., Hoeft, R. G., Mulvaney, R. L. Fate of Nitrogen-15 in a Long-Term Nitrogen Rate Study. Agronomy Journal. 97 (4), 1037 (2005).
  10. Recous, S., Fresneau, C., Faurie, G., Mary, B. The fate of labelled 15N urea and ammonium nitrate applied to a winter wheat crop. Plant and Soil. 112 (2), 205-214 (1988).
  11. Abendroth, L. J., Elmore, R. W., Boyer, M. J., Marlay, S. K. . Corn Growth and Development. , (2011).
  12. Gomez, K. A., Gomez, A. A. . Statistical Procedures for Agricultural Research. , (1984).
  13. Khan, S. A., Mulvaney, R. L., Brooks, P. D. Diffusion Methods for Automated Nitrogen-15 Analysis using Acidified Disks. Soil Science Society of America Journal. 62 (2), 406 (1998).
  14. Horneck, D. A., Miller, R. O. Determination of Total Nitrogen in Plant Tissue. Handbook of Reference Methods for Plant Analysis. , 75-84 (1998).
  15. . Carbon (13C) and Nitrogen (15N) Analysis of Solids by EA-IRMS Available from: https://stableisotopefacility.ucdavis.edu/13cand15n.html (2019)
  16. Stevens, W. B., Hoeft, R. G., Mulvaney, R. L. Fate of Nitrogen-15 in a Long-Term Nitrogen Rate Study: II. Nitrogen Uptake Efficiency. Agronomy Journal. 97 (4), 1046 (2005).
  17. . Fertilizing Corn in Minnesota Available from: https://extension.umn.edu/crop-specific-needs/fertilizing-corn-minnesota (2018)
  18. Blake, G. R., Hartge, K. H. Bulk Density. Methods of Soil Analysis: Part 1 Physical and Mineralogical Methods. , 363-375 (1986).
  19. Jokela, W. E., Randall, G. W. Fate of Fertilizer Nitrogen as Affected by Time and Rate of Application on Corn. Soil Science Society of America Journal. 61 (6), 1695 (2010).
  20. Hart, S. C., Stark, J. M., Davidson, E. A., Firestone, M. K. Nitrogen Mineralization, Immobilization, and Nitrification. Methods of Soil Analysis, Part 2. Microbiological and Biochemical Properties. (5), 985-1018 (1994).
  21. Olson, R. V. Fate of tagged nitrogen fertilizer applied to irrigated corn. Soil Science Society of America Journal. 44 (3), 514-517 (1980).
  22. Follett, R. F., Porter, L. K., Halvorson, A. D. Border Effects on Nitrogen-15 Fertilized Winter Wheat Microplots Grown in the Great Plains. Agronomy Journal. 83 (3), 608-612 (1991).
  23. Balabane, M., Balesdent, J. Input of fertilizer-derived labelled n to soil organic matter during a growing season of maize in the field. Soil Biology and Biochemistry. 24 (2), 89-96 (1992).
  24. Recous, S., Machet, J. M., Mary, B. The partitioning of fertilizer-N between soil and crop: Comparison of ammonium and nitrate applications. Plant and Soil. 144 (1), 101-111 (1992).
  25. Bigeriego, M., Hauck, R. D., Olson, R. A. Uptake, Translocation and Utilization of 15N-Depleted Fertilizer in Irrigated Corn. Soil Science Society of America Journal. 43 (3), 528 (1979).
  26. Glendining, M. J., Poulton, P. R., Powlson, D. S., Jenkinson, D. S. Fate of15N-labelled fertilizer applied to spring barley grown on soils of contrasting nutrient status. Plant and Soil. 195 (1), 83-98 (1997).
  27. Khanif, Y. M., Cleemput, O., Baert, L. Field study of the fate of labelled fertilizer nitrate applied to barley and maize in sandy soils. Fertilizer Research. 5 (3), 289-294 (1984).

Play Video

Cite This Article
Spackman, J. A., Fernandez, F. G. Microplot Design and Plant and Soil Sample Preparation for 15Nitrogen Analysis. J. Vis. Exp. (159), e61191, doi:10.3791/61191 (2020).

View Video