Summary

Conception de microplots et préparation d’échantillons de plantes et de sols pour 15analyses d’azote

Published: May 10, 2020
doi:

Summary

Une conception de microplots pour la recherche sur les traceurs de 15N est décrite pour tenir compte de multiples événements d’échantillonnage des plantes et des sols en saison. Des procédures de collecte et de traitement des échantillons de sol et d’usine, y compris les protocoles de broyage et de pesage, pour l’analyse de 15N sont mises de l’avant.

Abstract

De nombreuses études sur les engrais azotés évaluent l’effet global d’un traitement sur les mesures de fin de saison, comme le rendement des grains ou les pertes cumulatives de N. Une approche isotopique stable est nécessaire pour suivre et quantifier le sort de l’engrais dérivé du N (FDN) par le système de culture du sol. Le but de ce document est de décrire une conception de recherche sur de petites parcelles utilisant des microplots non confinés enrichis de 15N pour de multiples événements d’échantillonnage des sols et des plantes sur deux saisons de croissance et de fournir des protocoles de collecte, de manipulation et de traitement d’échantillons pour l’analyse totale de 15N. Les méthodes ont été démontrées à l’aide d’une étude reproduite du centre-sud du Minnesota plantée au maïs (Zea mays L.). Chaque traitement consistait en six rangées de maïs (espacement des rangées de 76 cm) de 15,2 m de long avec un microlot (2,4 m sur 3,8 m) intégré à une extrémité. L’urée de qualité engrais a été appliquée à 135 kg N-ha-1 lors de la plantation, tandis que le microplot a reçu de l’urée enrichie à 5 atomes % 15N. Des échantillons de sol et de plantes ont été prélevés plusieurs fois tout au long de la saison de croissance, en prenant soin de minimiser la contamination croisée en utilisant des outils distincts et en séparant physiquement des échantillons non enrichis et enrichis pendant toutes les procédures. Les échantillons de sol et de plantes ont été séchés, moulus pour passer à travers un écran de 2 mm, puis moulus à une consistance semblable à de la farine à l’aide d’un moulin à rouleaux. Les études de traceur exigent la planification supplémentaire, le temps de traitement d’échantillon et le travail manuel, et engagent des coûts plus élevés pour 15matériaux enrichis de N et l’analyse d’échantillon que les études traditionnelles de N. Toutefois, à l’aide de l’approche de l’équilibre de masse, les études de traceur avec de multiples événements d’échantillonnage en saison permettent au chercheur d’estimer la distribution du FDN par l’intermédiaire du système de culture du sol et d’estimer le FDN non comptabilisé du système.

Introduction

L’utilisation d’azote d’engrais (N) est essentielle dans l’agriculture pour répondre aux demandes alimentaires, de fibres, d’aliments pour animaux et de carburant d’une population mondiale croissante, mais les pertes de N provenant des champs agricoles peuvent avoir un impact négatif sur la qualité de l’environnement. Étant donné que n subit de nombreuses transformations dans le système de culture du sol, une meilleure compréhension du cycle N, l’utilisation des cultures et le sort global de l’engrais N sont nécessaires pour améliorer les pratiques de gestion qui favorisent l’efficacité de l’utilisation de N et minimisent les pertes environnementales. Les études traditionnelles sur les engrais n se concentrent principalement sur l’effet d’un traitement sur les mesures de fin de saison telles que le rendement des cultures, l’absorption de N par rapport au taux de N appliqué (efficacité apparente de l’utilisation des engrais) et l’efficacité résiduelle du sol N. Bien que ces études quantifient l’ensemble des intrants, des extrants et des gains d’efficacité du système N, elles ne peuvent ni identifier ni quantifier le N dans le système de culture du sol dérivé des sources d’engrais ou du sol. Une approche différente à l’aide d’isotopes stables doit être utilisée pour suivre et quantifier le sort du N dérivé de l’engrais (FDN) dans le système de culture du sol.

L’azote a deux isotopes stables, 14N et 15N, qui se produisent dans la nature à un rapport relativement constant de 272:1 pour 14N/15N1 (concentration de 0,366 atome % 15N ou 3600 ppm 15N2,3). L’ajout de 15engrais enrichis de N augmente la teneur totale de 15N du système de sol. Comme 15N engrais enrichi se mélange avec le sol non enrichi N, le changement mesuré de 14N /15N rapport permet aux chercheurs de tracer FDN dans le profil du sol et dans la culture3,4. Un solde de masse peut être calculé en mesurant la quantité totale de traceur de 15N dans le système et chacune de ses parties2. Étant donné que 15engrais enrichis de 15 N sont beaucoup plus chers que les engrais conventionnels, 15microplots enrichis de N sont souvent intégrés dans les parcelles de traitement. Le but de ce document de méthodes est de décrire une conception de recherche de petites parcelles utilisant des microplots pour de multiples épreuves d’échantillonnage en saison et d’échantillonnage des plantes pour le maïs(Zea mays L.) et de présenter des protocoles pour la préparation d’échantillons de plantes et de sols pour une analyse totale de 15N. Ces résultats peuvent ensuite être utilisés pour estimer l’efficacité de l’utilisation des engrais N et créer un budget N partiel tenant compte du FDN dans le sol en vrac et la culture.

Protocol

1. Description du site sur le terrain REMARQUE : Lors de l’exécution d’essais sur le terrain de traçage de 15N, les sites sélectionnés doivent réduire au minimum les variations dues au sol, à la topographie et aux caractéristiques physiques5. La contamination croisée peut se produire à la suite d’un mouvement latéral du sol dû à la translocation de la pente, du vent ou de l’eau, ou du travail du sol, tandis que la distribution verticale du s…

Representative Results

Les résultats présentés dans cet article proviennent d’un site de terrain établi en 2015 à l’Université du Minnesota Southern Outreach and Research Center situé près de Waseca, MN. Le site a été géré comme une rotation maïs-soja[Glycine max (L.) Merr] avant 2015, mais a été géré comme une rotation maïs-maïs au cours des saisons de croissance 2015 et 2016. Le sol était un loam d’argile Nicollet (fine-loamy, mixte, superactif, mésique Aquic Haplulls)-Webs…

Discussion

La recherche sur les isotopes stables est un outil utile pour le suivi et la quantification du FDN par l’entremise du système de culture du sol. Cependant, il y a trois hypothèses principales associées aux études de traceur de N qui, si elle est violée, peuvent invalider les conclusions tirées de l’utilisation de cette méthodologie. Ils sont 1) le traceur est uniformément réparti dans tout le système, 2) les processus dans le cadre de l’étude se produisent aux mêmes taux, et 3) N laissant la piscine enr…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Les auteurs reconnaissent le soutien du Minnesota Corn Research & Promotion Council, de la Hueg-Harrison Fellowship et de la Bourse Discovery, Research and InnoVation Economy (MnDRIVE) du Minnesota.

Materials

20 mL scintillation vial ANY; Fisher Scientific is one example 0334172C
250 mL borosilicate glass bottle QORPAK 264047
48-well plate EA Consumables E2063
96-well plate EA Consumables E2079
Cloth parts bag (30×50 cm) ANY NA For corn ears
CO2 Backpack Sprayer ANY; Bellspray Inc is one example Model T
Coin envelop (6.4×10.8 cm) ANY; ULINE is one example S-6285 For 2-mm ground plant samples
Corn chipper ANY; DR Chipper Shredder is one example SKU:CS23030BMN0 For chipping corn biomass
Corn seed ANY NA Hybrid appropriate to the region
Disposable shoe cover ANY; Boardwalk is one example BWK00031L
Ethanol 200 Proof ANY; Decon Laboratories Inc. is one example 2701TP
Fabric bags with drawstring (90×60 cm) ANY NA For plant sample collection
Fertilizer Urea (46-0-0) ANY NA ~0.366 atom % 15N
Hand rake ANY; Fastenal Company is one example 5098-63-107
Hand sickle ANY; Home Depot is one example NJP150 For plant sample collection
Hand-held soil probe ANY; AMS is one example 401.01
Hydraulic soil probe ANY; Giddings is one example GSPS
Hydrochloric acid, 12N Ricca Chemical R37800001A
Jar mill ANY; Cole-Parmer is one example SI-04172-50
Laboratory Mill Perten 3610 For grinding grain
Microbalance accurate to four decimal places ANY; Mettler Toledo is one example XPR2
N95 Particulate Filtering Facepiece Respirator ANY, ULINE is one example S-9632
Neoprene or butyl rubber gloves ANY NA For working in HCl acid bath
Paper hardware bags (13.3×8.7×27.8 cm) ANY; ULINE is one example S-8530 For soil samples and corn grain
Plant grinder ANY; Thomas Wiley Model 4 Mill is one example 1188Y47-TS For grinding chipped corn biomass to 2-mm particles
Plastic tags ULINE S-5544Y-PW For labeling fabric bags and microplot stalk bundles
Sodium hydroxide pellets, ACS Spectrum Chemical SPCM-S1295-07
Soil grinder ANY; AGVISE stainless steel grinder with motor is one example NA For grinding soil to pass through a 2-mm sieve
Tin capsule 5×9 mm Costech Analytical Technologies Inc. 041061
Tin capsule 9×10 mm Costech Analytical Technologies Inc. 041073
Urea (46-0-0) MilliporeSigma 490970 10 atom % 15N

References

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Cite This Article
Spackman, J. A., Fernandez, F. G. Microplot Design and Plant and Soil Sample Preparation for 15Nitrogen Analysis. J. Vis. Exp. (159), e61191, doi:10.3791/61191 (2020).

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