현재 연구에서 개발된 급성 간 부전 동물 모델은 잠재적인 치료법의 연구를 위한 실행 가능한 대안을 제시합니다. 현재 모델은 물리적 및 약물 유발 간 손상의 결합 된 효과를 채택하고 새로운 치료의 잠재력을 연구하기에 적합한 시간 창을 제공합니다.
급성 간 부전 (ALF) 신진 대사의 손실의 결과로 다양 한 병 인에 의해 발생 하는 임상 상태, 생 화 확 적인, 합성, 그리고 간 기능 해독. 대부분의 돌이킬 수없는 간 손상 의 경우, 직교 간 이식 (OLT) 유일한 가능한 치료 남아. ALF에 대 한 치료의 치료 잠재력을 연구 하기 위해, ALF의 동물 모델에서 그것의 이전 테스트필수적이다. 현재 연구에서, 쥐에 있는 ALF 모형은 48 시간의 치료 창을 제공하는 70% 부분 간절제술 (PHx) 및 아세트아미노펜 (APAP)의 주사를 결합해서 개발되었습니다. 간 질량의 70%를 절제하기 위해 간 중도 및 좌측 엽을 제거하고 APAP는 2일 동안 수술 후 24시간 주어졌다. ALF 유도 동물에서의 생존은 심각하게 감소되는 것으로 나타났다. ALF의 발달은 알란닌 아미노 트랜스퍼라제(ALT), 아스파르타테 아미노 트랜스퍼라제(AST), 알칼리성 인산파타제(ALP)의 혈청 수준을 변경하여 확인하였다; 프로트롬빈 시간의 변화 (PT); 국제 정상화 비율(INR)의 평가. qPCR에 의한 유전자 발현 프로필에 대한 연구는 세포사멸, 염증 및 간 손상의 진행에 관여하는 유전자의 발현 수준 증가가 나타났다. 간세포의 확산변성 및 면역세포의 침투는 조직학적 평가에 의해 관찰되었다. ALF의 가역성은 합성 건강한 랫트 간세포의 인트라스장내 이식 후 ALT, AST 및 ALP의 생존 및 혈청 수준의 복원에 의해 확인되었다. 이 모델은 ALF의 병리생리학을 연구하고 ALF에 대한 새로운 치료법의 잠재력을 평가하기 위해 이용 가능한 ALF 동물 모델에 대한 신뢰할 수 있는 대안을 제시한다. 두 개의 다른 접근의 사용은 또한 가능한 물리적 및 약물 유발 간 손상의 결합 된 효과 공부. 현재 절차의 재현성과 타당성은 모델의 추가적인 이점입니다.
급성 간부전(ALF)은 미국 간질환 연구에 의해 사전 손상 징후 없이 급성 간 손상의 급속한 발달로 정의되며 간장의 합성, 대사 및 해독 기능의 심각한 손상을 특징으로 한다1. ALF는 장기간 에 걸쳐 발생하는 간 손상의 결과로 실패가 발생하는 만성 간 부전과 급성 만성 간 부전 (ACLF)에서 발생하는 만성 간 기능 부전과 는 다르며, 만성 간 질환의 결과로 갑작스러운 간 손상이 발생하는2,3,4. ALF를 위한 유효한 치료는 정형외 간 이식 (OLT) 또는 죽음이 생길 수 있습니다. 간 기증자의 부족으로 인해 ALF를 앓고있는 환자의 사망률이 매우 높습니다.
대체 치료 접근법의 잠재력을 연구하고 ALF의 병리생리학을 더 잘 이해하기 위해서는 인간에서 발생하는 ALF를 반영할 수 있는 동물 모델이 필요합니다. 이미 사용 가능한 ALF 동물 모델의 대부분은 몇 가지 단점이 있습니다. 아세트아미노펜(APAP) 효과는 재현하기 어렵지만 시간적, 임상적, 생화학적 및 병리학적 매개 변수측면에서 가장 유사한 점이 있습니다. APAP-유도 동물 모델은 APAP 및 그중간체에의한 헤모글로빈의 산화에 의한 메테모글로빈혈증의 존재로 인해 종종 문제가 발생한다5,6,7. 또 다른 문제는 예측할 수 없는 복용량 응답 및 죽음의 시간에 의해 반영 된 재현성의 부족. 탄소 테트라 염화물 (CCl4)을사용하여 생산 된 ALF 동물 모델은8, 9,10,11의재현성이좋지 않습니다. 콘카발린 A(Con A) 및 리포슬리당(LPS)-유도 ALF 동물 모델은 자가면역 간 질환에 관여하는 세포 메커니즘의 연구및 패혈증의 연구에서 각각12,13,14,15의이점을 가지고 있지만, 인간 질환의 임상 적 패턴을 반영하지 않는다. 유사하게, 티오아세타미드(TAA)는 또한 활성 대사산물 티오아세타미드 설폭사이드에 대한 생체변환을 필요로 하며 종 변이를16,17,18,19를나타낸다. D-갈락토사민(D-Gal)은 ALF와 유사한 일부 생화학적, 대사적, 생리적 변화를 생성하지만 전체 ALF 병리학적 상태를 반영할 수없다(20,21,22,23) 더 나은 방식으로 ALF 증후군을 반영할 수 있는 ALF 모델을 개발하기 위해 이들 방법 중 2개 이상을 결합하려는 시도는 거의 없었다13. 따라서 질병 매개 변수를 반영할 수 있고, 재현성이 우수하며, 치료 적 개입의 효과를 연구할 충분한 시간을 제공하는 모델을 개발하기 위한 추가 연구가 요구된다.
현재 연구에서, 쥐에 있는 대안 ALF 모형은 부분 간절제술의 효력을 결합하여 만들어졌습니다 (PHx) 간 독성 시약의 더 낮은 복용량. APAP는 간 손상을 일으키는 데있어 잘 확립된 역할을 합니다5,24,25. 그것은 널리 사용 되는 진통제 이며 독성 대사 산물을 형성 하 여 supratherapeutic 복용량에서 간 독성. APAP는 선진국에서 많은 죽음의 원인입니다. 부분 간 절제술로 인한 신체적 상해는 간 재생뿐만 아니라 염증에 관련된 다양한 과정의 활성화를 시작합니다. 간 독성 제제 APAP의 주입은 간세포의 증식을 방지, 간장에서 적대적인 환경을 야기한다. 이것은 동물의 스트레스 기간을 감소시켜, 더 적은 용량의 간독소와 결합하면 절차의 재현성이 향상됩니다. 따라서이 모델을 사용하여 두 가지 유형의 간 손상의 조합 효과가 연구되었습니다. 개발된 ALF 동물 모델을 특성화하기 위해 생리학적 및 생화학적 파라미터가 연구되었다. ALF의 성공적인 가역성은 합성 건강한 랫트 간세포의 이식에 의해 확인되었다.
ALF에 적합한 동물 모델의 개발은 ALF의 병인과 진행을 더 잘 이해하기 위해 가장 중요합니다. 잘 특성화 된 ALF 동물 모델은 또한 ALF에 대한 새로운 치료 접근법의 개발 및 시험을위한 기회를 제공합니다. ALF6,12,21, 23,46,47,48의임상적?…
The authors have nothing to disclose.
이 작품은 생명 공학의 부서에서 받은 핵심 보조금에 의해 지원 되었다, 면역학의 국립 연구소에 인도정부, 뉴델리.
Acetaminophen (Biocetamol) | EG Pharmaceuticals | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Alkaline Phosphatase Kit (DEA) | Coral Clinical System, India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Automated analyser | Tulip, Alto Santracruz, India | Screen Maaster 3000 | Biochemical analyser for liver functional test |
Betadine (Povidon-Iodine Solution) | Win-Medicare; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Biological safety cabinet (Class I) | Kartos international; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Bright Field Microscope | Olympus, Japan | LX51 | |
Cefotaxime (Taxim®) | AlKem; India | cefotaxime sodium injection, No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Cell Strainer | Sigma; US | CLS431752 | |
Collagenase Type I | Gibco by Life Technologies | 17100-017 | |
Cotton Buds | Pure Swabs Pvt Ltd; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Drape Sheet | JSD Surgicals, Delhi, India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
DPX Mountant | Sigma; US | 6522 | |
Eosin Y solution, alcoholic | Sigma; US | HT110132 | |
Forceps | Major Surgicals; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Gas Anesthesia System | Ugo Basile; Italy | 211000 | |
Glucose | Himedia, India | GRM077 | |
Hair removing cream (Veet®) | Reckitt Benckiser, India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Hematoxylin Solution, Mayer's | Sigma; US | MHS16 | |
Heparin sodium salt | Himedia; India | RM554 | |
Hyaluronidase From Sheep Testes | Sigma; US | H6254 | |
I.V. Cannula (Plusflon) | Mediplus, India | Ref 1732411420 | |
Insulin Syringes | BD; US | REF 303060 | |
Isoflurane (Forane®) | Asecia Queenborough | No B506 | Inhalation Anaesthetic |
Ketamine (Ketamax®) | Troikaa Pharmaceuticals Ltd. | Ketamine hydrochloride IP, No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Meloxicam (Melonex®) | Intas Pharmaceuticals Ltd; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Micro needle holders straight & curved |
Mercian; England | BS-13-8 | |
Micro needle holders straight & curved |
Mercian; England | BS-13-8 | |
Microtome | Histo-Line Laboratories, Italy | MRS3500 | |
Nylon Thread | Mighty; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Paraformaldehyde | Himedia; India | GRM 3660 | |
Percoll® | GE Healthcare | 17-0891-01 | |
Refresh Tears/Eyemist Gel | Allergan India Private Limited/Sun Pharma, India | P3060 | No specific Catalog Number |
RPMI | Himedia; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Scalpel | Major Surgicals; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Scissors | Major Surgicals; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
SGOT (ASAT) KIT | Coral Clinical System, India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
SGPT (ALAT) KIT | Coral Clinical System, India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Shandon Cryotome E Cryostat | Thermo Electron Corporation; US | No specific Catalog Number | |
Sucrose | Sigma; US | S0389 | |
Surgical Blade No. 22 | La Medcare, India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Surgical Board | Locally made | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Surgical White Tape | 3M India; India | 1530-1 | Micropore Surgical Tape |
Sutures | Ethicon, Johnson & Johnson, India | NW 5047 | |
Syringes (1ml, 26 G) | Dispo Van; India | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
Trimmer (Clipper) | Philips | NL9206AD-4 DRACHTEN QT9005 | |
Weighing Machine | Braun | No specific Catalog Number (Local Procurement) | |
William's E Media | Himedia; India | AT125 | |
Xylazine (Xylaxin®) | Indian Immunologicals Limited | Sedative, Pre-Anaesthetic, Analgesic and muscle relaxant |