KRİYOPREZERVE Numune Kurtarma için Do-It-Yourself Aygıt yanlışlıkla Kriyojenik Depolama Tankları içine Dropped
Summary
Burada sıvı nitrojen dolu Dewar tanklardan numune alımı için düşük maliyetli, dayanıklı cryotolerant cihaz sunuyoruz. Inşaat ve cihaz modüler tasarım kolaylığı kriyojenik tanklarından numune alma işlemi güvenli ve kolay hale getirir.
Abstract
Sıvı nitrojen (-196 ° C) sıvı basıncı altında tutulması son derece soğuk, kokusuz, renksiz. Bu, genellikle kan, hücre ve doku 1,2 gibi biyolojik maddeler uzun süreli depolama için bir kriyojenik sıvısı olarak kullanılır. Sıvı azot kriyojenik doğası, numune korunması için ideal iken, kişi canlı dokuların hızlı dondurma neden olabilir – 'kriyojenik yanık' 2 olarak bilinen, yakın depolama ve Dewar numune alımı ilgili kişiler şiddetli soğuk yakmasına yol açabilir. Ayrıca sıvı azot buharlaşır gibi, havadaki oksijen konsantrasyonu azaltır ve özellikle kapalı alanlarda 2, asfiksi neden olabilir.
Laboratuvarlarımızda, biyolojik örnekler genellikle Dewar tankları 1 içinde paslanmaz çelik raflara yığılmış cryovials veya cryoboxes saklanır. Bu depolama rafları rafları dışarı kaymasını kutuları önlemek için uzun bir şaft ile ve dibine verilmektedirRutin kullanım sırasında Dewar. Tüm çok sık, ancak, değerli örnekleri ile kutular veya şişeleri dışarı kayma ve sıvı nitrojen dolu tankın dibine çöker. Bu gibi durumlarda, numuneler tediously yedek bir kap veya atmadan içine sıvı azot transfer sonra elde edilebilir. Kutuları ve şişeleri sonra nispeten güvenli boşalttı Dewar kurtarıldı olabilir. Ancak, sıvı azot, genişleme hızının kriyojenik doğa batık numune alma tehlikeli hale getirir. Genellikle numune alma tek bir kişi tarafından gerçekleştirilen asla bu Emniyet Müdürlükleri tarafından önerilir. Başka bir alternatif flakon 3 çıkarmak için piyasada bulunan serin gaspçı veya maşa kullanmaktır. Ancak, koyu sıvı dolu Dewar içinde sınırlı görünürlük kullanımı önemli bir sınırlama teşkil etmektedir.
Bu makalede, güvenli bir iki kriyojenik sıvılar içeren Dewar numune alma yapan bir Cryotolerant DIY alma cihazı, inşaat tarifnd kolay.
Protocol
Discussion
Dewar tankın dibinden cryoboxes ve cryovials almak en yaygın yöntemlerden biri yedek bir kap içine sıvı azot boşaltacaktır ve şişede kalan veya dekante sıvı azot içinde yüzen örnekleri çekin etmektir. Ancak bu, sıvı azot buharı uzun süre maruz 2. nedeniyle kriyojenik yanıklara veya boğulmaya neden olabilecek güvenli olmayan bir uygulamadır. Düşmüş cryovials alımı Diğer yaygın yolu cryovial maşa 3 kullanımını gerektirir. Bununla birlikte, sıvı azot ile doldurulm…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
DIY kriyojenik alma cihazı projeler Kanser Araştırma programı, Fen Virginia Akademisi Mary Louise Andrews Ödülü sponsorluğunda "biyoinformatik ve moleküler yaklaşımlar kullanılarak ökaryotik hücrelerde Modelleme bakteriyel protein prenylation", "Plazma RNA Düzenleme Fizyolojik Anlam sırasında test edilmiştir Thomas F. Jeffress ve Kate Miller Jeffress Memorial Trust ve Devlet Sözleşme 16.740.11.0364 (Bilim ve Eğitim Bakanlığı, Rusya) tarafından desteklenen dendritik hücreler ". Biz RNA bütünlük deneyi için yardım Beth Eom teşekkür etmek istiyorum.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Hillman Group Plated Slotted Flat 1-3/8 x 4 feet; 14 Gauge | Local Hardware shop | N/A | 1 unit required |
| Crown Bolt Stainless Steel #6 – 32 x 3/8 in. Oval Head Phillips Drive Machine Screw | Local Hardware shop | Model # 42281 | 4 units required |
| Crown Bolt 3/8 in. x 1-1/2 in. Zinc-Plated Steel Fender Washers | Local Hardware shop | Model # 20122 | 4 units required |
| Crown Bolt Zinc Plated #8-32 Machine Screw Nut | Local Hardware shop | Model # 18512 | 4 units required |
| Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in. Half Base | Local Hardware shop | Model # BC40Z | 2 units required |
| Simpson Strong-Tie 6 in. x 6 in. T Strap | Local Hardware shop | Model # 66T | 1 unit required |
| Oneida 6″ Mesh Strainer | Local Grocery shop | Model # 7859W | 1 unit required |
| The Hillman Group Galvanized Hex Nuts 3/8-16 | Local Hardware shop | Model #:810509 | 6 units required |
| The Hillman Group Galvanized Hex Bolts 3/8- 16 | Local Hardware shop | 4 units required | |
| Foam for insulation | Local Hardware shop | 1 unit required | |
| Screw Driver | Local Hardware shop | 1 unit required | |
| Pliers | Local Hardware shop | 1 unit required |
References
- Kittel, P. . Advances in Cryogenic Engineering. , 41 (1996).
- Edeskuty, F. J., Walter, F. . Stewart Safety in the handling of cryogenic fluids. , (1996).
- Council, N. R. . Prudent Practices in the Laboratory: Handling and Management of Chemical Hazards. , (2011).
- Muyal, J., Muyal, V., Kaistha, B., Seifart, C., Fehrenbach, H. Systematic comparison of RNA extraction techniques from frozen and fresh lung tissues: checkpoint towards gene expression studies. Diagnostic Pathology. 4, 9 (2009).
- Sambrook, J., Russell, D. W. . Molecular cloning: a laboratory manual. , (2001).
- Holland, N. T., Smith, M. T., Eskenazi, B., Bastaki, M. Biological sample collection and processing for molecular epidemiological studies. Mutation Research/Reviews in Mutation Research. 543, 217-234 (2003).
- Lynch, P. T. CELL, TISSUE AND ORGAN CULTURE | Storage and Cryopreservation. Encyclopedia of Rose Science. , 106-111 (2003).
- Crawford, R. J. . Plastics Engineering. , (1998).
- Gorenc, B., Tinyou, R., Syam, A. . Steel designers’ handbook. , (1996).
- Harper, C. A., Petrie, E. M. Plastics materials and processes: a concise encyclopedia. Wiley-Interscience. , (2003).
