Summary

Cryopreserved 샘플 복구를 위해 손수 함 장치 실수로 극저온 저장 탱크 떨어졌고

Published: May 11, 2012
doi:

Summary

여기에서 우리는 액체 질소로 가득 Dewar 탱크에서 샘플 검색을 위해 저렴한 비용, 내구성 cryotolerant 장치를 제시. 건설 장비의 모듈식 설계의 용이성은 극저온 탱크에서 시료를 쓰는 과정이 안전하고 쉽습니다.

Abstract

액체 질소 (-196도 ℃) 액체 압력 하에서 보관 매우 춥고, 무취, 무색이다. 그것은 일반적으로 같은 혈액, 세포 및 조직의 1,2 등 생물 학적 물질의 장기 보관을위한 극저온 유체로 사용됩니다. 액체 질소 극저온 자연, 샘플 보존에 적합 반면, 문의에 대한 살아있는 조직의 급속한 동결을 일으킬 수 있습니다 – '극저온 화상'2로 알려진, 밀접하게 저장 및 Dewars에서 샘플 검색에 관련된 사람에 심한 동상으로 이어질 수 있습니다. 또한 액체 질소가 증발은 공기 중의 산소 농도를 줄이고, 특히 밀폐된 공간 2, 질식을 일으킬 수 있습니다.

실험실에서 생물 학적 샘플은 종종 Dewar 탱크 1 ~ 스테인레스 스틸 선반에 쌓인 cryovials 또는 cryoboxes에 저장됩니다. 이러한 스토리지 랙에은 랙에으로부터 줄어 드에서 박스를 방지하기 위해 긴 샤프트와 함께 하단에 제공됩니다루틴 처리시 Dewars. 모든 너무 자주, 그러나 귀중한 표본과 상자나 유리병 삐져 나올 액체 질소 채워 탱크의 바닥에 가라 앉다. 그러한 경우에는 샘플은 지루하고 여분의 용기 또는 폐기 그것에 액체 질소를 전송 후 검색할 수 있습니다. 상자와 유리병 후 비교적 안전하게 비우지 Dewar에서 회복 될 수 있습니다. 그러나, 액체 질소와 그 팽창 률의 극저온 자연 침몰한 샘플 회수 위험을 만듭니다. 이것은 일반적으로 시료 회수가 한 사람에 의해 실시 않을 것이 안전 기관에 의해 권장합니다. 또 다른 대안은 유리병 3 끄집어 상용 시원한 그래버이나 집게를 사용하는 것입니다. 그러나, 짙은 액체 충​​만 Dewars 내에서 제한된 가시들이 사용하는 주요 제한 포즈.

이 문서에서 우리는 안전하고 모두 극저온 유체를 포함하는 Dewar에서 샘플 검색을하게 Cryotolerant DIY 복구 장치의 건설을 설명기 쉬운.

Protocol

1. Cryoboxes의 검색을 위해 Cryotolerant 장치의 조립 . 펜치를 사용하여, 3 양면 강한 넥타이 (그림 1A)하게 패 모양의 강한 타이 그림 1B에 표시된 참고 한쪽을 평탄케 : 강한 타이의 크기는 Dewar의 목의 직경에 따라 선택하실 수 있습니다 . . 그림 3 (AB)와 같이 Cryoscoop 기반을 형성 크라운 볼트 너트, 와셔 및 나사를 사용하여 ?…

Discussion

Dewar 탱크의 바닥에서 cryoboxes 및 cryovials를 검색하는 가장 일반적인 방법 중 하나는 여분의 용기에 액체 질소를 가만히 따르다하고 플라스크에 남아있는 또는 decanted 액체 질소에 떠 샘플을 끄집어하는 것입니다. 그러나 이것은 액체 질소 증기에 장시간 노출이에 의한 극저온 화상이나 질식의 원인이 될 수 있습니다 안전 연습이다. 타락한의 cryovials의 검색의 다른 일반적인 방법은 cryovial ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

DIY 극저온 회수 장치 프로젝트 암 연구 프로그램, 과학 버지니아 학원에 메리 루이스 앤드류스 수상의 후원 "생물 정보학 및 분자 접근법을 사용하여 진핵 세포의 모델링 세균성 단백질 prenylation", "플라즈마에서 RNA 편집의 생리 의미의 과정에서 테스트되었습니다 토마스 F. Jeffress와 케이트 밀러 Jeffress 기념관 신뢰와 국가 계약 16.740.11.0364 (과학 교육부, 러시아)의 후원 돌기 세포. " 우리는 RNA 무결성 실험과 도움 베스 EOM 감사드립니다.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Hillman Group Plated Slotted Flat 1-3/8 x 4 feet; 14 Gauge Local Hardware shop N/A 1 unit required
Crown Bolt Stainless Steel #6 – 32 x 3/8 in. Oval Head Phillips Drive Machine Screw Local Hardware shop Model # 42281 4 units required
Crown Bolt 3/8 in. x 1-1/2 in. Zinc-Plated Steel Fender Washers Local Hardware shop Model # 20122 4 units required
Crown Bolt Zinc Plated #8-32 Machine Screw Nut Local Hardware shop Model # 18512 4 units required
Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in. Half Base Local Hardware shop Model # BC40Z 2 units required
Simpson Strong-Tie 6 in. x 6 in. T Strap Local Hardware shop Model # 66T 1 unit required
Oneida 6″ Mesh Strainer Local Grocery shop Model # 7859W 1 unit required
The Hillman Group Galvanized Hex Nuts 3/8-16 Local Hardware shop Model #:810509 6 units required
The Hillman Group Galvanized Hex Bolts 3/8- 16 Local Hardware shop   4 units required
Foam for insulation Local Hardware shop   1 unit required
Screw Driver Local Hardware shop   1 unit required
Pliers Local Hardware shop   1 unit required

References

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Cite This Article
Mehta, R., Baranova, A., Birerdinc, A. Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks. J. Vis. Exp. (63), e3903, doi:10.3791/3903 (2012).

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