Aguda e crônica teste sensorial tátil após a lesão medular em ratos
Summary
Descrevemos dois métodos táteis testes sensoriais para períodos agudos ou crônicos de lesão medular em ratos. Estes procedimentos validados pode detectar o desenvolvimento e manutenção da alodinia-like sensações.
Abstract
Lesão da medula espinal (SCI) prejudica os sistemas sensoriais causando alodinia 1-8. Para identificar as causas celulares e moleculares da alodinia, sensíveis e testes sensoriais válido em modelos de ratos SCI é necessário. No entanto, até recentemente, nenhuma abordagem de teste único foi validado para a SCI de modo que os métodos padronizados não foram implementadas em laboratórios. Além disso, métodos de teste disponíveis não poderiam ser implementadas de forma aguda ou grave do motor quando existiam deficiências, impedindo estudos sobre o desenvolvimento do SCI-induzida alodinia 3. Aqui nós apresentamos dois métodos de ensaio sensoriais através von Frey cabelo (VFH) monofilamentos que quantificam mudanças táteis limiares sensoriais após SCI 4-5. Um teste é o bem estabelecida teste Up-Down que demonstra alta sensibilidade e especificidade em diferentes gravidades do SCI, quando testado cronicamente 5. O outro teste é um teste recentemente desenvolvido VFH dorsal que pode ser aplicada de forma aguda após SCI quando umllodynia desenvolve, antes da recuperação motora 4-5. Cada monofilamento VFH aplica uma força calibrado quando tocado para a pele da pata traseira até se dobra. No método de cima para baixo, VFHs alternadas de forças superiores ou inferiores são usados no dermátomo L5 plantar para delinear limiares de retirada flexores. Sucessivamente mais elevadas forças são aplicadas até retirada ocorre em seguida, VFHs menor força é usado até retirada cessa. O limiar táctil reflecte a força necessária para eliciar retirada em 50% dos estímulos. Para o teste de novo, cada VFH é aplicado ao dermátomo dorsal L5 da pata do rato, enquanto é suportado pelo avaliador. A estimulação VFH ocorre em ordem crescente de vigor até pelo menos 2 dos 3 aplicações de uma determinada força produz a retirada da pata. Limiar sensorial táctil é a força mais baixa para eliciar% retirada 66 do tempo. Procedimentos de testes de aclimatação, e pontuação são descritos. Ensaios aberrantes que exigem um reteste ensaios e típicos são definidos. Uso de Animais waprovado pela Ohio State University Animal Care e do Comitê uso.
Protocol
Discussion
Os métodos de ensaio VFH aqui apresentados representam dois paradigmas de teste que são sensíveis e válido para uso em modelos de ratos SCI. É importante ressaltar que o teste VFH dorsal foi criado para avaliação da recuperação da sensação tátil das patas traseiras de forma aguda após médio-torácico SCI quando ratos são incapazes de estar em seus quartos traseiros. Este paradigma de teste pode também ser utilizado quando os ratos recuperar a capacidade de suportar o seu peso e para os membros posteriore…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NIH NS43798 (DMB), F31 NS058138 NIH (MRD); P30-NS045758 (CBSCR), e os Veteranos Paralisados da América # 2451 (DMB) e # 2707 (MRD).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Semmes-Weinstein Monofilaments | Stoelting Co | 58011 | |
| Fish Breeder Box | Aquarium Supply Store | Hole drilled in side for cereal delivery | |
| Elevated wire mesh (1/4″ X 1/4″ grid) | Hardware Store | ||
| Elastic to hold fish breeder box in place | Craft Store | ||
| Sugared Cereal | Grocery Store | ||
| Surgical Huck Towel 16″x 23″ | Medical Supply Store |
References
- Cruz-Almeida, Y., Felix, E. R., Martinez-Arizala, A., Widerstrom-Noga, E. G. Pain symptom profiles in persons with spinal cord injury. Pain Med. 10, 1246-1259 (2009).
- Hulsebosch, C. E. From discovery to clinical trials: treatment strategies for central neuropathic pain after spinal cord injury. Curr. Pharm. Des. 11, 1411-1420 (2005).
- Kloos, A. D., Fisher, L. C., Detloff, M. R., Hassenzahl, D. L., Basso, D. M. Stepwise motor and all-or-none sensory recovery is associated with nonlinear sparing after incremental spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 191, 251-265 (2005).
- Detloff, M. R. Remote activation of microglia and pro-inflammatory cytokines predict the onset and severity of below-level neuropathic pain after spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 212, 337-347 (2008).
- Detloff, M. R. Validity of acute and chronic tactile sensory testing after spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 225, 366-376 (2010).
- Hutchinson, K. J., Gomez-Pinilla, F., Crowe, M. J., Ying, Z., Basso, D. M. Three exercise paradigms differentially improve sensory recovery after spinal cord contusion in rats. Brain. 127, 1403-1414 (2004).
- Carlton, S. M. Peripheral and central sensitization in remote spinal cord regions contribute to central neuropathic pain after spinal cord injury. Pain. 147, 265-276 (2009).
- Lindsey, A. E. An analysis of changes in sensory thresholds to mild tactile and cold stimuli after experimental spinal cord injury in the rat. Neurorehabil. Neural Repair. 14, 287-300 (2000).
- Basso, D. M. Behavioral testing after spinal cord injury: congruities, complexities, and controversies. J. Neurotrauma. 21, 395-404 (2004).
- Langford, D. J. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312, 1967-1970 (2006).
