쥐의 척수를 다친 후에 급성 및 만성 촉각 감각 테스트
Summary
우리는 쥐의 척수 손상의 급성 또는 만성 기간을위한 두 촉각 감각 테스트 방법을 설명합니다. 이러한 확인 절차는 allodynia 같은 감각의 개발과 유지 보수를 검색할 수 있습니다.
Abstract
척수 손상 (SCI)는 allodynia 1-8을 일으키는 감각 시스템을 impairs. 민감한 allodynia의 세포와 분자 원인, 그리고 쥐 SCI 모델에서 유효한 감각 테스트를 식별하는 것이 필요합니다. 그 표준화된 방법이 연구소를 통해 구현되지 않은 않도록 그러나 최근까지 단일 테스트 접근법은 SCI에 대한 검증도 있었다. 또한, 가능한 테스트 방법은 심하게 구현되지 않았습니다이나 심한 운동 장애가 존재하면, SCI 유발 allodynia 3의 개발 연구를 방지. 여기 SCI 4-5 이후에 촉각 감각 임계값의 변화를 계량 폰 프라이 머리 (VFH) monofilaments을 사용하여 두 검증 관능 검사 방법을 제시한다. 한 검사는 만성 5 테스트한 다른 SCI의 severities에 걸쳐 높은 감도와 특이성을 보여주는 탄탄한 위, 아래 테스트입니다. 다른 시험은 SCI 후 심하게 적용할 수있는 신개발 지느러미 VFH 시험 때llodynia 전에 모터 회복 4-5로 개발하고 있습니다. 그것 숨어까지 뒷다리 손 피부에 닿는 순간 각 VFH의 monofilament는 보정 력을 적용합니다. 위, 아래 방법으로 높거나 낮은 세력의 교체 VFHs는 flexor 탈퇴 임계값을 윤곽을 그리다 위해 발바닥 5 번 dermatome에 사용됩니다. 철수가 낮은 힘 VFHs는 탈퇴가 멈추면 때까지 사용 후 발생할 때까지 연속 높은 세력이 적용됩니다. 촉각 임계값은 자극의 50 %에서 인출을 유도하는 데 필요한 힘을 반영한다. 쥐은 시험관에서 지원하는 동안 새로운 시험은 각 VFH는 손 등 부분의 5 번 dermatome에 적용됩니다. VFH의 자극이 주어진 힘이에서 3 응용 프로그램의 최소 2의 발자국이 탈퇴를 생산하기 전까지 힘의 오름차순으로 발생합니다. 촉각 감각 임계값은 시간의 철회 66%을 유도하기 위해 가장 낮은 원동력이다. Acclimation, 테스트 및 채점 절차가 설명되어 있습니다. 재시험 전형적인 시련을 필요로 탈선 재판이 정의됩니다. 동물 사용하는 w같은 오하이오 주립 대학 동물 보호 및 사용위원회에 의해 승인했다.
Protocol
Discussion
VFH 테스트 방법은 민감하고 쥐의 SCI 모델에 사용할 유효한 두 테스트 패러다임을 대표 여기서 제시. 중요한 것은, 지느러미 VFH 시험 쥐들은 엉덩이쪽에 서있을 수 없을 때 심하게 중반 흉부 SCI를 따라 뒷다리 발냄새 촉각 감각의 회복의 평가를 위해 만들었습니다. 쥐가 자신의 무게를 지탱하고 경추 SCI 후 두 다리를 위해있는 능력을 되찾을 때 테스트 패러다임도 사용할 수 있습니다.
<p clas…Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NIH NS43798 (DMB), NIH F31 NS058138 (MRD) P30-NS045758 (CBSCR) 및 미국 마비 재향 # 2451 (DMB) 및 # 2707 (MRD).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Semmes-Weinstein Monofilaments | Stoelting Co | 58011 | |
| Fish Breeder Box | Aquarium Supply Store | Hole drilled in side for cereal delivery | |
| Elevated wire mesh (1/4″ X 1/4″ grid) | Hardware Store | ||
| Elastic to hold fish breeder box in place | Craft Store | ||
| Sugared Cereal | Grocery Store | ||
| Surgical Huck Towel 16″x 23″ | Medical Supply Store |
References
- Cruz-Almeida, Y., Felix, E. R., Martinez-Arizala, A., Widerstrom-Noga, E. G. Pain symptom profiles in persons with spinal cord injury. Pain Med. 10, 1246-1259 (2009).
- Hulsebosch, C. E. From discovery to clinical trials: treatment strategies for central neuropathic pain after spinal cord injury. Curr. Pharm. Des. 11, 1411-1420 (2005).
- Kloos, A. D., Fisher, L. C., Detloff, M. R., Hassenzahl, D. L., Basso, D. M. Stepwise motor and all-or-none sensory recovery is associated with nonlinear sparing after incremental spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 191, 251-265 (2005).
- Detloff, M. R. Remote activation of microglia and pro-inflammatory cytokines predict the onset and severity of below-level neuropathic pain after spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 212, 337-347 (2008).
- Detloff, M. R. Validity of acute and chronic tactile sensory testing after spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 225, 366-376 (2010).
- Hutchinson, K. J., Gomez-Pinilla, F., Crowe, M. J., Ying, Z., Basso, D. M. Three exercise paradigms differentially improve sensory recovery after spinal cord contusion in rats. Brain. 127, 1403-1414 (2004).
- Carlton, S. M. Peripheral and central sensitization in remote spinal cord regions contribute to central neuropathic pain after spinal cord injury. Pain. 147, 265-276 (2009).
- Lindsey, A. E. An analysis of changes in sensory thresholds to mild tactile and cold stimuli after experimental spinal cord injury in the rat. Neurorehabil. Neural Repair. 14, 287-300 (2000).
- Basso, D. M. Behavioral testing after spinal cord injury: congruities, complexities, and controversies. J. Neurotrauma. 21, 395-404 (2004).
- Langford, D. J. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312, 1967-1970 (2006).
