Acuta e Cronica test sensoriale tattile dopo lesione del midollo spinale in ratti

Summary

Descriviamo due metodi di test sensoriali tattili per periodi acuti o cronici di lesioni del midollo spinale nei ratti. Queste procedure validate in grado di rilevare lo sviluppo e la manutenzione di allodinia simili sensazioni.

Abstract

Lesione del midollo spinale (SCI) altera i sistemi sensoriali che causano allodinia ^1-8. Per identificare le cause cellulari e molecolari di allodinia, sensibile e valido test sensoriali su ratti modelli SCI è necessario. Tuttavia, fino a poco tempo fa, un approccio unico test è stato validato per SCI in modo che i metodi standardizzati non sono stati attuati attraverso laboratori. Inoltre, metodi di prova disponibili non hanno potuto essere attuate acuta o quando esistono gravi difficoltà motorie, impedendo gli studi dello sviluppo di SCI-indotta allodinia ^3. Qui vi presentiamo due metodi di test convalidati sensoriali utilizzando von Frey capelli (VFH) monofilamenti che quantificano cambiamenti soglie sensoriali tattili dopo SCI ^4-5. Una prova è la ben consolidata Up-Down prova che dimostra un'alta sensibilità e specificità nei diversi livelli di gravità durante il test SCI cronicamente ^5. Il test è un altro recente sviluppo di test VFH dorsale che può essere applicato dopo acutamente SCI quandollodynia sviluppa, prima del motore recupero ^4-5. Ogni monofilamento VFH applica una forza calibrata quando viene toccata alla pelle della zampa posteriore fino piega. Nel metodo di up-down, VFHs alternanza di forze superiori o inferiori sono usati sul plantare dermatomero L5 a delineare soglie di ritiro flessori. Successivamente le forze più elevate vengono applicate fino alla sospensione si verifica allora VFHs forza inferiori vengono utilizzati fino alla sospensione cessa. La soglia tattile riflette la forza necessaria per provocare il ritiro nel 50% degli stimoli. Per il nuovo test, ogni VFH viene applicato al dermatomero L5 dorsale della zampa il ratto è supportato dal esaminatore. La stimolazione VFH si verifica in ordine crescente di forza almeno fino al 2 di 3 applicazioni ad una data forza produce il ritiro zampa. Soglia sensoriale tattile è la più bassa forza per sollecitare il ritiro il 66% del tempo. Procedure di acclimatazione, di prova e di scoring sono descritti. Sperimentazioni aberranti che richiedono un test retest e tipico sono definiti. Animal uso wcome approvato dalla Ohio State Animal Care University e del Comitato uso.

Protocol

1. Up / Down plantare Von Frey Testing Lo scopo della prova è di determinare la sensibilità tattile misurando la forza molto è richieste per provocare il ritiro zampa dallo stimolo. Disponibili in commercio calibrati Von monofilamenti capelli Frey tra gli intervalli di 4,56 e 6,10 sono utilizzati per stimolare la zampa. Altri stimoli sensoriali, come la visualizzazione dello stimolo o di propriocezione può confondere le misure di soglia tattili così risposte basate su input visivi o propr…

Discussion

I metodi di prova VFH qui presentati rappresentano due paradigmi di test che sono sensibili e valida per l'utilizzo in modelli di ratto SCI. È importante sottolineare che il test dorsale VFH è stato creato per la valutazione del recupero della sensazione tattile delle zampe posteriori acutamente seguenti mediotoracico SCI quando i ratti sono in grado di reggersi sulle proprie posteriori. Questo paradigma di test può essere utilizzato anche quando i ratti riacquistare la capacità di sostenere il loro peso e per g…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments
Semmes-Weinstein Monofilaments	Stoelting Co	58011
Fish Breeder Box	Aquarium Supply Store		Hole drilled in side for cereal delivery
Elevated wire mesh (1/4″ X 1/4″ grid)	Hardware Store
Elastic to hold fish breeder box in place	Craft Store
Sugared Cereal	Grocery Store
Surgical Huck Towel 16″x 23″	Medical Supply Store