يوصف بروتوكول لإقناء ؛ إدخال القنية من الغدة اللعابية تحت الفك السفلي الماوس عبر قناة وارتون. عن هذه التجربة ، يتم استخدام محلول أزرق التريبان بوصفها صباغ لشرح كيفية توفر هذه التقنية بشكل فعال في ضخ الغدة المستهدفة ، وتشير إلى إمكانية التعويل على هذا النهج الجديد كعلاج المخدرات / خلية السريرية المحتملة لتجديد الغدد اللعابية.
Abstract
وكثيرا ما وجدت شديدة hypofunction الغدد اللعابية في المرضى الذين يعانون من متلازمة سجوجرن والذين يتلقون العلاج في تشعيع رؤوسهم ومناطق الرقبة لعلاج السرطان. كلا المجموعتين من المرضى أعراض الخبرة مثل جفاف الفم (جفاف الفم) ، عسر البلع (ضعاف المضغ والبلع) ، تسوس الأسنان الحادة ، والذوق تتغير ووادي الذهب ، البلعوم العدوى (المبيضات) ، التهاب الغشاء المخاطي والألم والانزعاج.
وتكهن أحد النهج المبتكرة للطب التجديدي لعلاج قصور الغدة اللعابية وظيفة في ريدمان RS ، E Mezey وآخرون 2009 : يمكن أن الخلايا الجذعية التي تودع مباشرة إقناء ؛ إدخال القنية في غدة كوسيلة فعالة في إحياء وظائف ضعاف الجهاز. يفترض ، فإن ترحيل الخلايا الجذعية الخارجية تفرق في الخلايا الغدية لتعمل كجزء من الغدة اللعابية المضيف. أيضا ، وهذا الأسلوب هو أسلوب إقناء ؛ إدخال القنية تسليم سريعة وفعالة لتطبيق نقل الجينات السريرية.
نحن هنا لتوضيح الخطوات المتبعة في تنفيذ الإجراء إقناء ؛ إدخال القنية على الغدة اللعابية تحت الفك السفلي الماوس عبر قناة وارتون (الشكل 1). وتستخدم C3H الفئران (نهر تشارلز ، مونتريال ، QC ، كندا) لهذه التجربة ، والتي ظلت نظيفة في ظل الظروف التقليدية في مركز جامعة ماكجيل الموارد الحيوانية. وقد تمت الموافقة على جميع التجارب من قبل لجنة رعاية الحيوان وجامعة وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي بشأن رعاية الحيوان.
عن هذه التجربة ، هي التي غرست حل التريبان الأزرق في الغدة من خلال افتتاح قناة وارتون باستخدام حقنة الانسولين مع إبرة عيار 29 مغلف داخل أنبوب من البولي إثيلين. بعد ذلك ، يتم تشريح الماوس لتظهر أن هاجرت إلى ضخ الغدة بنجاح.
Protocol
1. وصف الإجرائية حقن تحت الجلد 1 ميكروليتر / غرام من وزن الجسم من 0.5 ملغ / مل سلفات الأتروبين مونوهيدرات (القط # 11330 ، Fluka ، الولايات المتحدة) في كل فأر لمنع الإفرازات اللعابية من عرقلة حركة الضخ. ?…
Discussion
وصعوبة في استخدام هذا الأسلوب هو إقناء ؛ إدخال القنية لمنع حويضي من الحل حقن. حتى إذا حل التريبان الأزرق قد هاجروا بشكل مؤقت في الغدة اللعابية بنجاح ، قد إفراز اللعاب تتداخل مع عملية الضخ وتسبب حويضي من الحل التريبان الأزرق خارج الغدة. كإجراء وقائي ، بالإضافة إلى استخ…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
المؤلفون ممتنون للدكتور آنا Cotrim للتشاور والتقنية للدكتور Monzur مرشد للمعدات. وكان في جزء منه بتمويل هذا العمل من قبل المعاهد الكندية لأبحاث الصحة.
Materials
Name of the reagent
Type
Company
Catalogue number
Comments (optional)
Atropine
Drug
Fluka
11330
To inhibit saliva secretion
Ketamine
Drug
Phoenix Scientific
Sedation
Xylazine
Drug
Phoenix Scientific
Polyethylene tubing (0.58 mm diameter)
Tube
Intramedic PE-10, Becton Dickinson Diagnostic Systems
427410
To insert over tip of needle to avoid tissue injury during insertion into Wharton’s duct.
Kuriki, Y., Liu, Y., Xia, D., Gjerde, E. M., Khalili, S., Mui, B., Zheng, C., Tran, S. D. Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton’s Duct. J. Vis. Exp. (51), e3074, doi:10.3791/3074 (2011).