Инъекции инсулина и гемолимфы добычи для измерения чувствительности к инсулину у взрослых Дрозофилы</em
Summary
Консервативные сигнализации инсулина пути найдены в плодовой мушки<em> Дрозофилы</em> Сделайте этот организм потенциального инструмента для моделирования метаболических расстройств, включая сахарный диабет II типа. В связи с этим, очень важно установить физиологические тесты для эффективного измерения системного действия инсулина в периферической глюкозы в распоряжении взрослых летать.
Abstract
Консервативные питательных зондирования механизмы существуют между млекопитающими и плодовой мушки, где пептиды напоминающие млекопитающих инсулина и глюкагона, соответственно функция для поддержания гомеостаза глюкозы во время развития личиночной 1,2 этапов. Исследования в основном на пост-митотического мухи взрослых показали возмущения гомеостаза глюкозы в результате генетических абляции инсулин-подобный пептид (ЦЛП) продуцирующих клеток (IPC) 3. Таким образом, взрослые мухи весьма перспективны в качестве подходящей модели генетической системы для метаболических заболеваний, включая диабет второго типа. В целях дальнейшего развития системы плодовой мушки, сравнимый физиологические тесты, используемые для измерения толерантности к глюкозе и чувствительность к инсулину у млекопитающих должны быть установлены. С этой целью мы недавно описал роман методика измерения устный ответ на толерантность к глюкозе у взрослого человека летать и продемонстрировали важность для взрослых IPCs в поддержании гомеостаза глюкозы 4,5. Здесь мы изменили ранее описанной процедуры для инъекций инсулина 6 и соединил его с нового метода добычи гемолимфы для измерения периферической чувствительности к инсулину у взрослого человека летать. Уникально, наш протокол позволяет прямого физиологического измерения способности взрослой мухи распоряжаться периферических нагрузки глюкозой на инсулинотерапии, методологию, которая делает возможным охарактеризовать инсулина мутантов и возможных мер, влияющих на толерантность к глюкозе и чувствительность к инсулину у взрослой мухи.
Protocol
Discussion
Методике, описанной в настоящем докладе, потенциально полезны в любых исследований, которые исследует физиологические процессы, в результате чего обнаруживаются изменения в состав гемолимфы дрозофилы. Объединив впрыска и гемолимфы коллекции таким образом, можно установить непо…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана грантами НИА к YW.CF (AG21068, AG31086).
Materials
| Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| Bovine insulin | Sigma | I5500 |
| Infinity Glucose Reagent | Thermo Electron Corporation | TR1541 |
| Manual microinjector | Sutter Instrument | |
| P-87 Flamming/Brown micropipette puller | Sutter Instrument | |
| Single barrel borosilicate capillary glass | A-M Systems | 626000 |
| FD&C Blue No. 1 | McCormick & Company | |
| 1 μl microcapillary tubes | Drummond | |
| Three-axis manual micromanipulator and base | World Precision Instruments |
References
- Rulifson, E. J., Kim, S. K., Nusse, R. Ablation of insulin-producing neurons in flies: growth and diabetic phenotypes. Science. 296, 1118-1118 (2002).
- Kim, S. K., Rulifson, E. J. Conserved mechanisms of glucose sensing and regulation by Drosophila corpora cardiaca cells. Nature. 431, 316-316 (2004).
- Broughton, S. J. Longer lifespan, altered metabolism, and stress resistance in Drosophila from ablation of cells making insulin-like ligands. Proc Natl Acad Sci U S A. 102, 3105-3105 (2005).
- Haselton, A. Partial ablation of adult Drosophila insulin-producing neurons modulates glucose homeostasis and extends life span without insulin resistance. Cell Cycle. 9, 3063-3063 (2010).
- Haselton, A. T., Fridell, Y. W. Adult Drosophila melanogaster as a model for the study of glucose homeostasis. Aging (Albany NY). 2, 523-523 (2010).
- Belgacem, Y. H., Martin, J. R. Disruption of insulin pathways alters trehalose level and abolishes sexual dimorphism in locomotor activity in Drosophila. J Neurobiol. 66, 19-19 (2006).
- Demerec, M. . Biology of Drosophila. , (1950).
