Summary

インスリン注射と成人のインスリン感受性を測定する血リンパの抽出キイロショウジョウバエ</em

Published: June 30, 2011
doi:

Summary

ショウジョウバエに見られる保存されたインスリンのシグナル伝達経路<em>キイロショウジョウバエ</em>この生物II型糖尿病を含む代謝性疾患をモデル化するための潜在的なツールとなっています。そのためには、効果的に成人ハエの末梢グルコース処理の全身のインスリン作用を測定するための生理学的アッセイを確立することが重要です。

Abstract

保存された栄養感知のメカニズムが発達幼虫期の1,2時の血糖値の恒常性を維持するために、それぞれのペプチドは哺乳類のインスリンとグルカゴンに似た哺乳類やショウジョウバエ、機能間に存在する。主に有糸分裂後の成人のハエの研究は、インスリン様ペプチドの遺伝子除去(ILP)産生細胞(IPC)を3の結果としてグルコースの恒常性の摂動を明らかにした。したがって、成人ミバエは、II型糖尿病を含む代謝性疾患に適した遺伝的モデルシステムとして有望視されて保持する。さらにショウジョウバエのシステムを開発するには、哺乳動物における耐糖能とインスリン感受性を測定するために使用される同等の生理的アッセイを確立する必要があります。この目的のために、我々は最近、成人のハエにおける経口ブドウ糖負荷応答を測定するための新たな手順を記載していると4,5グルコース恒常性を維持するに成人IPCの重要性を示した。ここで、我々は、インスリンの注射6前述の手順を変更し、成体のハエで、末梢インスリン感受性を測定するために新たな血リンパの抽出法とそれを組み合わせている。一意に、我々のプロトコルは、インスリン注射、インスリンシグナル伝達変異体と大人のハエの耐糖能とインスリン感受性に影響を与える潜在的な介入を特徴づけることが可能になる方法論に応じて末梢グルコース負荷を処分する大人ハエの能力の直接的な生理学的な測定が可能です。

Protocol

1。インスリン溶液の調製は0.01 mg / mlの濃度を達成するためにPBSでインスリンを溶解することにより新鮮なウシのインスリン溶液を調製します。インスリン/ PBSおよび制御PBSの両方のソリューションは、注射の手順では氷上で保存する必要があります。これらのソリューションは、0.5%(v / v)のFD&Cブルーなしで準備する必要があります。 1食品着色料。 2。?…

Discussion

このレポートに記載されている方法は、 ショウジョウバエの血リンパの組成の検出可能な変化をもたらす生理学的プロセスを調査するあらゆる研究に有用である可能性がある。この方法で注入し、血リンパのコレクションを組み合わせることで、それは特定の実験的治療または操作の直接の生理学的に関連する影響を把握することが可能です。断頭2を含む以前の技術よりも体…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、NIAからYW.CF(AG21068、AG31086)への補助金によって支えられている。

Materials

Name of the reagent/equipment Company Catalogue number
Bovine insulin Sigma I5500
Infinity Glucose Reagent Thermo Electron Corporation TR1541
Manual microinjector Sutter Instrument  
P-87 Flamming/Brown micropipette puller Sutter Instrument  
Single barrel borosilicate capillary glass A-M Systems 626000
FD&C Blue No. 1 McCormick & Company  
1 μl microcapillary tubes Drummond  
Three-axis manual micromanipulator and base World Precision Instruments  

References

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Cite This Article
Haselton, A. T., Fridell, Y. C. Insulin Injection and Hemolymph Extraction to Measure Insulin Sensitivity in Adult Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (52), e2722, doi:10.3791/2722 (2011).

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