Summary

注射胰岛素和血淋巴的提取来衡量成人胰岛素敏感性果蝇</em

Published: June 30, 2011
doi:

Summary

保守的胰岛素信号通路在果蝇中发现<em>果蝇</em>使这个有机体建模,包括II型糖尿病的代谢紊乱的潜在工具。为此,关键是建立生理检测在成人飞周边葡萄糖处置全身胰岛素的作用,以有效衡量。

Abstract

保守的营养感应机制之间存在着哺乳动物和果蝇肽类似哺乳动物的胰岛素和胰高血糖素,分别在幼虫阶段发育1,2维持血糖平衡的功能。主要有丝分裂后的成年果蝇的研究发现扰动糖代谢的胰岛素生产细胞(IPCS)3样肽(ILP)的遗传消融的结果。因此,成年果蝇保持一个合适的代谢紊乱,包括II型糖尿病的遗传模型系统的巨大潜力。为了进一步发展果蝇系统,用于测量哺乳动物糖耐量和胰岛素敏感性的可比生理检测,必须建立。为此,我们最近测量口服葡萄糖容忍的反应在成人飞介绍一种新的程序,并表现出成人的IPC的重要性,在维持血糖稳态4,5。在这里,我们已经修改为先前所描述的胰岛素注射6的程序,并结合血淋巴中提取了一种新的方法来测量在成人飞周围胰岛素敏感性。与众不同的是,我们的协议允许成年果蝇的能力,处置周边葡萄糖负荷时注射胰岛素的方法,使胰岛素信号突变和影响成人飞糖耐量和胰岛素敏感性的潜在干预是可行的特点直接的生理测量。

Protocol

1。胰岛素溶液的制备准备新鲜牛胰岛素溶液溶解在PBS中的胰岛素,达到0.01毫克/毫升的浓度。胰岛素/ PBS和控制PBS解决方案必须保持整个注射过程中的冰。这些解决方案应与0.5%(V / V)FD&C蓝色没有准备。 1食品着色剂。 2。针的制备和注射设置使用一个车夫设置产生足够的质量针注射微量puller.The:热火,345;拉,210;速度,100;时间,200(100毫秒),准备?…

Discussion

在本报告中描述的技术在任何调查在果蝇血淋巴成分的检测的改变导致生理过程的研究,是潜在有用的。通过以这种方式相结合的注射和血淋巴收集,它是可能的,以确定一个特定的实验性治疗或操纵的切身有关生理影响。这种“放血”技术的主要优点是收集超过以前的技 ​​术,涉及斩首 2血淋巴,这种技术最大限度地减少污染血淋巴样品与肠道contents.If护理是不收取任何pericereb…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

这项工作是从NIA的YW.CF(AG21068,AG31086)的赠款支持。

Materials

Name of the reagent/equipment Company Catalogue number
Bovine insulin Sigma I5500
Infinity Glucose Reagent Thermo Electron Corporation TR1541
Manual microinjector Sutter Instrument  
P-87 Flamming/Brown micropipette puller Sutter Instrument  
Single barrel borosilicate capillary glass A-M Systems 626000
FD&C Blue No. 1 McCormick & Company  
1 μl microcapillary tubes Drummond  
Three-axis manual micromanipulator and base World Precision Instruments  

References

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Cite This Article
Haselton, A. T., Fridell, Y. C. Insulin Injection and Hemolymph Extraction to Measure Insulin Sensitivity in Adult Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (52), e2722, doi:10.3791/2722 (2011).

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