بروتوكول التالية توضح عملية عزل والتهوية والرئتين instrumenting الماوس لقياس الأوعية الدموية الرئوية الثابتة أو نابض ضغط التدفق العلاقات من أجل تحديد الآثار المترتبة على تدفق الدم ، وتدفق الهواء ، والتغيرات الهوائية والأوعية الدموية التغييرات على حمولة تلوية البطين الأيمن.
المعزولة ، التهوية والمجهزة إعداد الرئة الماوس يسمح بقياس الأوعية الدموية الرئوية مطرد ونابض ضغط التدفق العلاقات مع مستقلة السيطرة على معدل التدفق الشرياني الرئوي ، وتدفق معدل الموجي ، ضغط الهواء وضغط الأذين الأيسر. يحسب المقاومة الوعائية الرئوية على أساس متعدد النقطة ، منحنيات ضغط التدفق المطرد ؛ يحسب مقاومة الأوعية الدموية الرئوية من منحنيات ضغط تدفق نابض الحصول على مجموعة من الترددات. كما يعترف الآن سريريا ، هو قياس المعاوقة متفوقة من حمولة تلوية البطين الأيمن من المقاومة لأنها تضم تأثيرات الامتثال الأوعية الدموية ، والتي لا يكاد يذكر ، وخصوصا في الدورة الدموية الرئوية. ثلاثة قياسات مهمة للمقاومة — صفر هيرتز المعاوقة Z 0 ، خاصية مقاومة Z C ، ومؤشر انعكاس موجة R ث — توفير نظرة ثاقبة القاصي منطقة مستعرضة الشرياني المتاحة للتدفق ، وتصلب الشرايين ومقاومة الداني في المنبع والمصب فمنها ، على التوالي. جميع النتائج التي تم الحصول عليها في عزلة ، وتهوية الرئتين perfused تكون مستقلة من المتعاطفين نغمة الجهاز العصبي ، والحالة حجم وآثار التخدير. وقد استخدمنا هذه التقنية لقياس أثر الصمات الرئوية المزمنة ونقص الأكسجين على المقاومة والممانعة ، والتفريق بين مواقع العمل (أي مقابل الداني القاصي) من وكلاء فعال في الأوعية والأمراض باستخدام التبعية ضغط Z C. وعلاوة على ذلك ، وعندما تستخدم هذه التقنيات مع الرئتين من سلالات من الفئران المعدلة وراثيا ، يمكن تحديد الآثار المترتبة على المستوى الجزيئي عيوب الأوعية الدموية الرئوية في الهيكل والوظيفة.
خطوات حاسمة في الجراحة
فمن الأهمية بمكان أن يتم أخذ الحذر عند قطع القفص الصدري بعيدا عن الرئتين. يجب أن تكون عرضة الرئتين تماما وغير مطروقة من قبل الأنسجة المحيطة بها ولكن ليس خلال التضخم التي تضررت خلال عملية العزل. ويمكن استخدام ?…
The authors have nothing to disclose.
وأيد هذا البحث من المعاهد الوطنية للصحة منح R01HL086939 (NCC).
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
1 ml syringe | Fisher Sci | 14-829-10F | ||
10 ml syringe | Fisher Sci | 14-823-2A | ||
60 ml syringe | Fisher Sci | 13-689-8 | ||
RPMI with GLN 6/PK | Fisher Sci | MT10040CV | ||
Bottle Top Filters | Fisher Sci | 09-761-57 | ||
Ficoll PM 70 | Sigma-Aldrich | F2878-100g | ||
Heparin | Sigma-Aldrich | |||
Y27632 | Sigma-Aldrich | Y0503 | ||
Angled Ball Iris scissors | Fine Science Tools | 14109-09 | ||
Vannas Spring Scissors – 4mm Blades | Fine Science Tools | 15018-10 | ||
Fine Iris Scissors – straight | Fine Science Tools | 14106-09 | ||
Dumont #5/45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | ||
Dumont Medical Biology Forceps | Fine Science Tools | 11254-20 | ||
Lauda E100 ECO-line 003 | VWR | Comparable to Lauda-Brinkmann E-103, 62400-922 | ||
IL-1 Isolated perfused mouse lung system | Harvard Apparatus | 739904 | ||
Blood Pressure Transducer P75 for PLUGSYS Module | Harvard Apparatus | 730020 | ||
TS410 Flow Modules | Transonic | TS410 | ||
ME 4 PXN Precision PXN Inline Flowsensors | Transonic | ME 4 PXN | ||
Cole-Parmer Multi-Syringe Pumps | Cole-Parmer | EW-74900-20 | ||
Nembutal 50MG/ML 20ML Vial | Amatheon |