ヒト胚性幹細胞(ヒトES)とヒトの人工多能性幹細胞(hiPSCs)を含むヒト多能性幹細胞(hPSCsは)彼らの無限の自己複製機能と、複数の細胞型に分化する潜在能力に起因する刺激的な細胞源です。 hPSCsの多能性状態は、典型的には、定量PCR、免疫細胞化学などの手法によって評価され、その他で<em> in vitroで</em>と<em> in vivoで</em複数の細胞型へ>差別化戦略。これらの中でも、免疫細胞化学的手法は、候補細胞内および細胞表面マーカーの分析に基づいてhPSCsの未分化状態の日常的特性評価のために開発されている。 hPSCsがコロニーとして成長しているという事実を考えると、問題は定期的に個々の細胞レベルでこれらのマーカーの発現を定量化するに生じる。フローサイトメトリー分析は、この問題に対処するが、細胞数を必要とし、通常はhPSC文化の日常的な品質管理の評価のための助長ではない試薬を使用するのに役立つ。このように、マーカーの評価のために保存整合性と単層の細胞サンプルの作成の実践的かつ再現可能な手段の開発は、幹細胞研究の多くの利点があります。単分子層からの個々の細胞が容易に特定のマーカーの発現について観察し、定量化できるため、これは大幅に免疫細胞化学的分析に利益をもたらします。この目標に向けて、自作サイトスピン装置が建設され、免疫細胞化学染色の使用に最適化。二つの細胞表面マーカー(SSEA3/SSEA4)式は、このプロトコルの目的のためにバリアントBG01の幹細胞株で分析した。
Pascual, E. Y., Riggs, M. J., Rao, R. R. Immunocytochemical Analysis of Human Pluripotent Stem Cells using a Self-Made Cytospin Apparatus. J. Vis. Exp. (38), e1944, doi:10.3791/1944 (2010).