La organización anatómica del cerebro de los primates puede proporcionar información importante sobre las condiciones normales y patológicas en los seres humanos. Estereología imparcial es un método de forma precisa y eficiente la estimación del número de neuronas total (o otro tipo de células) en un espacio de referencia dado<sup> 1</sup>.
Abstract
Los primates no humanos es una importante especie de traslación para entender los procesos normales de funcionamiento y las enfermedades del cerebro humano. Estereología imparcial, el método aceptado como estado de la técnica para la cuantificación de los objetos biológicos en secciones de tejido<sup> 2</sup>, Genera datos fiables sobre la estructura de las características biológicas en el cerebro de los mamíferos<sup> 3</sup>. Los componentes clave del enfoque son imparciales (sistemática aleatoria) de muestreo de las estructuras anatómicas definidas (los espacios de referencia), en combinación con la cuantificación del número de células y las longitudes de tamaño, la fibra capilar y, superficies, volúmenes regionales y la distribución espacial de los objetos biológicos en el espacio de referencia<sup> 4</sup>. Entre las ventajas de estos métodos estereológicos sobre los métodos anteriores es la prevención de todas las fuentes conocidas de error sistemático (no aleatorio) que surgen de suposiciones incorrectas y modelos que no son verificables. Este estudio documenta una aplicación biológica de estereología computarizado para estimar la población total de neuronas en la corteza frontal del cerebro, los monos verdes (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>), Con la ayuda de dos programas estereología disponibles en el mercado, Ciencias de la Vida y Bioquant Stereologer (Figura 1). Además de contraste y la comparación de los resultados tanto de la Bioquant y<em> Stereologer</em> Sistemas, este estudio proporciona un protocolo detallado para la<em> Stereologer</em> Sistema.
Protocol
Parte 1: Pre-procesamiento de los tejidos se debe hacer de acuerdo con Burke et al. (2009) 5. En pocas palabras, el tejido debe estar bien perfundidos con paraformaldehido, glutaraldehido, o formalina. Esto se puede lograr a través de la perfusión estándar transcardial normalmente se utiliza para la cosecha de otros órganos. En el presente estudio el tema fue profundamente sedado con clorhidrato de ketamina (10 mg / kg, im), sacrificados con una sobredosis de pentobarbital sódico (25 mg / kg, …
Discussion
Estereología imparcial en un cerebro de los primates es similar a la de otras muestras biológicas. Sin embargo, dado el tamaño del cerebro de los primates, un plan de tratamiento cuidadoso, se recomienda desde un solo hemisferio de los monos verdes se obtienen más de 1200 secciones en rodajas a 50 micras. En primer lugar se recomienda stereotaxically bloqueando el cerebro en bloques de 1 cm, que proporciona un avión estándar de la sección entre los bloques y temas, minimiza las secciones parciales entre los bloqu…
Acknowledgements
Los autores desean agradecer a Ikiel Ptito por su apoyo técnico continuo. NSERC otorgar a MP.
Burke, M., Zangenehpour, S., Mouton, P. R., Ptito, M. Knowing What Counts: Unbiased Stereology in the Non-human Primate Brain. J. Vis. Exp. (27), e1262, doi:10.3791/1262 (2009).