L'organizzazione anatomica del cervello dei primati in grado di fornire spunti importanti in condizioni normali e patologiche nell'uomo. Tutti stereologia è un metodo per precisione ed efficienza stimare il numero totale dei neuroni (o tipo di cellula) in uno spazio di riferimento dato<sup> 1</sup>.
Abstract
Il primate non umano è una specie importante traslazionale per la comprensione dei processi di normale funzione e malattie del cervello umano. Stereologia imparziali, il metodo accettato come state-of-the-art per la quantificazione di oggetti biologici in sezioni di tessuto<sup> 2</sup>, Genera affidabili dati strutturali per le caratteristiche biologiche del cervello dei mammiferi<sup> 3</sup>. I componenti chiave dell'approccio sono obiettive (sistematico-casuale) il campionamento di strutture anatomicamente definito (spazi di riferimento), combinata con la quantificazione del numero di cellule dimensioni e lunghezze, fibre e capillari, superfici, volumi regionali e distribuzione spaziale degli oggetti biologici all'interno del riferimento spazio<sup> 4</sup>. Tra i vantaggi di questi approcci stereological rispetto ai metodi precedenti è quello di evitare tutte le fonti conosciute di errore sistematico (non casuale) derivanti da assunzioni errate e non verificabili modelli. Questo studio documenta una applicazione biologica di stereologia computerizzati per stimare la popolazione neuronale nella corteccia frontale del cervello della scimmia cercopiteco (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>), Con l'assistenza di due programmi stereologia disponibili in commercio, Scienze della Vita e BioQuant Stereologer (Figura 1). Oltre a contrasto e il confronto dei risultati sia dal BioQuant e<em> Stereologer</em> Sistemi, questo studio fornisce un protocollo dettagliato per la<em> Stereologer</em> Sistema.
Protocol
Parte 1: Pre-trattamento dei tessuti deve essere fatto secondo Burke et al. (2009) 5. In breve, il tessuto deve essere ben perfusi con paraformaldeide, glutaraldeide, o formalina. Questo può essere raggiunto attraverso standard di perfusione transcardial tipicamente usato per raccogliere altri organi. Nel presente studio il soggetto era profondamente sedato con cloridrato di ketamina (10 mg / kg, im), eutanasia con una dose eccessiva di sodio pentobarbital (25 mg / kg, iv) e perfusi transcardially…
Discussion
Stereologia Tutti in un cervello dei primati è simile a quella di altri campioni biologici. Tuttavia, date le dimensioni del cervello dei primati, un piano di trattamento è raccomandato un attento quanto un singolo emisfero della scimmia cercopiteco produce più di 1200 sezioni al taglio a 50 micron. In primo luogo si consiglia stereotaxically bloccare il cervello in blocchi 1 cm, che fornisce un piano standard di sezione tra blocchi e soggetti, minimizza le sezioni parziali tra i blocchi, e fornisce gestibile blocchi…
Acknowledgements
Gli autori desiderano ringraziare Ikiel Ptito per il suo continuo supporto tecnico. NSERC concedere a MP.
Burke, M., Zangenehpour, S., Mouton, P. R., Ptito, M. Knowing What Counts: Unbiased Stereology in the Non-human Primate Brain. J. Vis. Exp. (27), e1262, doi:10.3791/1262 (2009).