线虫神经肌肉交界处的解剖和录制
Summary
电的应用访问突触的突触活动提供量化的测量，分析突触的突变体。本文介绍了一种夹层的方法，用来揭露神经肌肉接头（NMJ）<em>线虫（线虫）</em并简要讨论了一些可用于本制剂的使用。
Abstract
神经递质是其中神经元突触后的目标，快速的时间尺度上，通过化学信号传输的信息的过程。这一复杂的过程，需要许多前和突触后蛋白的协调活动，以确保合适的突触连接，电信号的传导，目标和分泌泡，钙传感，囊泡融合，本地化和突触后受体的功能的吸，最后，回收机制。作为神经学家，它是我们的目标是澄清在其中的每个步骤功能的蛋白质，并了解他们的行动机制。从突触的电生理记录提供一个量化的基础突触传递过程中发生的电气事件读出。通过结合这项技术可用于处理C.突触蛋白的分子和遗传工具，强大的阵列线虫 ，我们可以分析导致突触传递功能的变化。
c. 在线虫 NMJs之间形成运动神经元和体壁的肌肉控制运动，因此，不协调locomotory表型（UNC小号）的突变体，往往扰乱这些突触1突触传递。由于UNC突变体的一种细菌的食物来源丰富的供应维持，他们依然是可行的，只要保留一些咽抽水能力摄取食物。这一点，连同事实，C 。 线虫为雌雄同体的存在，使他们能够通过突变后代，而不需要精心设计的交配行为。这些属性，再加上我们最近从蠕虫记录NMJs 2,3,7这是一个很好的模式生物来解决如何准确 UNC突变影响神经递质的能力。
解剖的方法包括使用cyanoacrylic胶，以使切口暴露在蠕虫的NMJs角质层固定成虫。由于C。线虫成年人只有1毫米的长度进行解剖与解剖显微镜的使用，需要良好的手眼协调。 NMJ录音是由全细胞电压钳位个人体壁肌肉细胞和神经递质的释放，可以使用各种刺激的协议，包括电疗，光激活通道的视紫红质介导的去极化4和高渗盐水，所有这些都将是诱发简要描述。
Protocol
Discussion
遗传模式生物，线虫是非常适合的突触传递的研究，通过突触蛋白编码基因的突变在功能分析。在这里，我们描述了一个夹层技术，呈现了C.线虫 NMJs电生理分析访问。影随行描绘了C.的关键步骤线虫的解剖和典型的录音配置，用于测量突触活动。在学习这一技术带来的最大挑战的三个步骤; 1）蠕虫胶合一步，2）执行一个成功的切口，3）体壁肌肉的修补。一旦这些已经?…
Acknowledgements
本文是由美国国立卫生研究院拨款，以耶。我想感谢亚历戈特沙尔克博士提供胆碱能运动神经元在录音示威中所使用的转基因表达渠道的视紫红质的蠕虫。
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