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Chapters
- 00:05Introduction
- 01:00Screening Zebrafish Larvae for rpe65a:nfsB-eGFP and Genetic Ablation of the Retinal Pigment Epithelium
- 03:02Incorporating Pharmacological Treatment into Zebrafish Retinal Pigment Epithelium Ablation Protocol
- 06:35Confocal Microscope Z-stack Image Preprocessing in FIJI (ImageJ)
- 08:19Quantification and Visualization of RPE Regeneration Using RpEGEN Scripts
- 10:42Results: RPE Expression, Ablation, Regeneration Quantification
- 12:39Conclusion
Este protocolo descreve a metodologia para abolar geneticamente o epitélio pigmento da retina (RPE) usando um modelo transgênico de zebrafish. A adaptação do protocolo para incorporar a modulação da via de sinalização usando compostos farmacológicos é extensivamente detalhada. Uma plataforma MATLAB para quantificar a regeneração de RPE com base na pigmentação foi desenvolvida e é apresentada e discutida.
