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Ablation médiée par la nitroréductase/métronidazole et une plate-forme MATLAB (RpEGEN) pour l’étude de la régénération de l’épithélium pigmentaire rétinien du poisson-zèbre
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Nitroreductase/Metronidazole-Mediated Ablation and a MATLAB Platform (RpEGEN) for Studying Regeneration of the Zebrafish Retinal Pigment Epithelium
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Ablation médiée par la nitroréductase/métronidazole et une plate-forme MATLAB (RpEGEN) pour l’étude de la régénération de l’épithélium pigmentaire rétinien du poisson-zèbre

DOI:
10.3791/63658-v

•

13:12 min

•

March 02, 2022

•

, ,
1Department of Ophthalmology, Louis J. Fox Center for Vision Restoration,University of Pittsburgh School of Medicine, 2Earth Research Institute,University of California, Santa Barbara, 3Department of Developmental Biology,University of Pittsburgh School of Medicine

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:00Screening Zebrafish Larvae for rpe65a:nfsB-eGFP and Genetic Ablation of the Retinal Pigment Epithelium
  • 03:02Incorporating Pharmacological Treatment into Zebrafish Retinal Pigment Epithelium Ablation Protocol
  • 06:35Confocal Microscope Z-stack Image Preprocessing in FIJI (ImageJ)
  • 08:19Quantification and Visualization of RPE Regeneration Using RpEGEN Scripts
  • 10:42Results: RPE Expression, Ablation, Regeneration Quantification
  • 12:39Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Ce protocole décrit la méthodologie pour ablation génétique de l’épithélium pigmentaire rétinien (EPR) à l’aide d’un modèle transgénique de poisson-zèbre. L’adaptation du protocole pour incorporer la modulation de la voie de signalisation à l’aide de composés pharmacologiques est très détaillée. Une plate-forme MATLAB pour quantifier la régénération RPE basée sur la pigmentation a été développée et est présentée et discutée.

Tags

ZebrafishRetinal Pigment EpitheliumRPERegenerationNitroreductaseMetronidazoleMATLABRpEGENAblationTransgenicEGFPPTUPharmacological Treatment

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