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Fluoreszenzmikroskopie für ATP-Internalisierung, vermittelt durch Makropinozytose in menschlichen Tumorzellen und tumor-xenografierten Mäusen
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1Department of Biological Sciences,Ohio University, 2Molecular and Cellular Biology Program,Ohio University, 3Neuroscience Program,Ohio University, 4Edison Biotechnology Institute,Ohio University, 5Translational Biomedical Sciences Program,Ohio University, 6Honors Tutorial College,Ohio University, 7Department of Biomedical Sciences, Heritage College of Osteopathic Medicine,Ohio University
Chapters
- 00:05Introduction
- 01:05Tumor Cell Culture and Xenograft Tumor Development
- 02:41HMWFD and NHF-ATP Solution Preparation
- 03:21ATP Internalization in Tumor Xenograft
- 03:53Cryo-embedding
- 04:45Tissue Slide Fixation
- 05:25Fluorescence Microscopy and Image Acquisition
- 07:12Results: Assessment of Nonhydrolyzable Fluorescent ATP Internalization
- 07:44Conclusion
Wir haben eine reproduzierbare Methode entwickelt, um die Internalisierung von nicht hydrolysierbarem fluoreszierendem Adenosintriphosphat (ATP), einem ATP-Surrogat, mit hoher zellulärer Auflösung sichtbar zu machen. Wir validierten unsere Methode mit unabhängigen In-vitro- und In-vivo-Assays - humane Tumorzelllinien und immundefiziente Mäuse, die mit menschlichem Tumorgewebe xenotransplantiert wurden.
