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Polarisation des cellules et analyses dérivées des monocytes humains M1 et M2 avec cytométrie du débit sur l’infection par mycobactérie tuberculeuse
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1Center for Infectious Medicine (CIM), Department of Medicine Huddinge, ANA Futura,Karolinska Institutet, 2Infectious Diseases Division,International Centre for Diarrhoeal Disease Research, Bangladesh, 3Clinical Microbiology, Department of Laboratory Medicine (Labmed), ANA Futura,Karolinska Institutet, 4Childhood Cancer Research Unit, Department of Women’s and Children’s Health,Karolinska Institutet
Chapters
- 00:04Introduction
- 00:44Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation
- 01:40Monocyte-Derived Cell Differentiation and Polarization
- 03:25Mycobacterium tuberculosis (Mtb) Culture
- 05:00Monocyte-Derived Cell Mtb Infection
- 06:03Flow Cytometry Staining and Analysis
- 07:40Results: Representative Phenotypic M1 and M2 Cell Characterization Before and After Mtb Infection
- 09:47Conclusion
Ce protocole fournit une méthode pour étudier l’infection de mycobactérie de tuberculose dans les macrophages humains M1- ou M2-polarisés basés sur la différenciation des monocytes périphériques de sang aux cellules macrophage-comme qui sont infectées par la souche virulente GFP-étiquetée H37Rv, et analysées avec la cytométrie de flux utilisant un panneau de 10 couleurs comprenant l’expression des marqueurs M1/M2 choisis.
