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Perfil celular de alto rendimiento de compuestos de degradación de proteínas específicas utilizando líneas celulares HiBiT CRISPR
JoVE Journal
Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
High-Throughput Cellular Profiling of Targeted Protein Degradation Compounds Using HiBiT CRISPR Cell Lines
DOI:

05:33 min

November 09, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Endpoint Degradation Studies with HiBiT CRISPR Target Proteins in Lytic Format with Optional Cell Viability Fluorescence Analysis
  • 03:07Results: Degradation Compound Analysis in a HiBiT CRISPR Cell Line
  • 04:51Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este protocolo describe la detección luminiscente cuantitativa de la cinética de degradación de proteínas en células vivas que se han diseñado utilizando CRISPR / Cas9 para expresar la etiqueta de detección de proteínas endógenas libres de anticuerpos fusionada a una proteína diana. Se incluyen instrucciones detalladas para calcular y obtener parámetros cuantitativos de degradación, tasa, Dmax, DC 50 y Dmax50.

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