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Perfil celular de alto rendimento de compostos de degradação de proteínas direcionadas usando linhas celulares CRISPR HiBiT
JoVE Journal
Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
High-Throughput Cellular Profiling of Targeted Protein Degradation Compounds Using HiBiT CRISPR Cell Lines
DOI:

05:33 min

November 09, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Endpoint Degradation Studies with HiBiT CRISPR Target Proteins in Lytic Format with Optional Cell Viability Fluorescence Analysis
  • 03:07Results: Degradation Compound Analysis in a HiBiT CRISPR Cell Line
  • 04:51Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este protocolo descreve a detecção luminescente quantitativa da cinética de degradação de proteínas em células vivas que foram modificadas usando CRISPR/Cas9 para expressar a etiqueta de detecção endógena livre de anticorpos fundida a uma proteína-alvo. Instruções detalhadas para calcular e obter parâmetros quantitativos de degradação, taxa, Dmax, DC 50 e Dmax50 estão incluídas.

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